[发明专利]一种替度鲁肽的制备方法

权利要求书

1.一种替度鲁肽的制备方法，其特征在于，主要包括如下步骤：用固相多肽合成法制备Met(O)替度鲁肽肽树脂，Met(O)替度鲁肽肽树脂经裂解还原得到替度鲁肽粗品；其中，在固相多肽合成中，Met偶联时采用Fmoc-Met(O)-OH，其余采用相应的保护氨基酸或片段。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，Met(O)替度鲁肽肽树脂经裂解还原时，采用的裂解还原试剂为TFA、A试剂和B试剂的混合物；其中，A试剂选自TIS和C试剂，C试剂选自MeSiCl₃、苯甲硫醚、EDT、DTT、苯甲醚、Me₂S、苯硫酚、H₂O中的一种或多种；B试剂选自NH₄I、TMSBr、TMSCl、Bu₄NBr、Bu₄NCl中的一种。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述裂解还原试剂TFA：A试剂：B试剂的体积比为(85-95)：(4-10)：(1-5)。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述其余采用相应的保护氨基酸或片段包括采用S1-S4片段，具体为Boc-His(X₁)-(X₂)Gly-Asp(OtBu)-(X₂)Gly四肽片段，其中X₁选自Trt、Boc、Bom；X₂选自Hmb、Dmb。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述其余采用相应的保护氨基酸或片段包括采用Fmoc-N(X₃)Ala-OH片段，其中X₃选自Hmb或Dmb。

6.根据权利要求1-5任一所述的制备方法，其特征在于，所述步骤具体为：

步骤1：将树脂固相载体和Fmoc-Asp(OtBu)-OH偶联，得到Fmoc-Asp(OtBu)-树脂；

步骤2：通过固相合成法，在步骤1制得的Fmoc-Asp(OtBu)-树脂上，按照替度鲁肽的肽序依次偶联Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-AA₁-OH、Fmoc-AA₂-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Met(O)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Boc-His(X₁)-(X₂)Gly-Asp(OtBu)-(X₂)Gly，制得Met(O)替度鲁肽肽树脂；其中，AA₁、AA₂分别选自N(X₃)Ala和Ala，X₃选自Hmb或Dmb；

步骤3：将步骤2制得的Met(O)替度鲁肽肽树脂经裂解还原得到替度鲁肽粗品。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中树脂固相载体选自CTCResin或Wang Resin。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述CTC Resin的替代度为0.4mmol/g-1.2mmol/g，所述Wang resin的替代度为0.4mmol/g-1.2mmol/g。

9.根据权利要求1-5、7、8任一所述制备方法，其特征在于，制得的替度鲁肽粗品经纯化、冻干之后得到替度鲁肽纯品。