[发明专利]真核重组蛋白在试剂盒中的应用、试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 202111207794.5 | 申请日： | 2021-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN113929753A | 公开（公告）日： | 2022-01-14 |
| 发明（设计）人： | 叶建强;隆玉兰;谢松桦;张建军;张伟;谢泉;万志敏;李拓凡;王伟康 | 申请（专利权）人： | 扬州大学;国药集团扬州威克生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/075 | 分类号： | C07K14/075;C12N15/866;C12N5/10;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 南京源点知识产权代理有限公司 32545 | 代理人： | 陈彩霞;王佳妹 |
| 地址： | 225000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 蛋白 试剂盒 中的 应用 及其 | ||
1.真核重组Fiber-1蛋白和/或真核重组Fiber-2蛋白在制备用于检测Fiber蛋白抗体的试剂盒中的应用，其特征在于，所述真核重组Fiber-1蛋白和/或真核重组Fiber-2蛋白由Sf9昆虫表达系统表达获得。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述表达是将重组杆状病毒rBacmid-FAdV-4-Fiber-1、rBacmid-FAdV-4-Fiber-2分别感染Sf9细胞，收集细胞经重悬、破碎、离心、纯化后得到所述真核重组Fiber-1蛋白和所述真核重组Fiber-2蛋白。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述感染时间为72～120h，所述破碎为40～50Hz、间隔8～10s进行超声破碎。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂盒中包括酶标板，所述真核重组Fiber-1蛋白和/或真核重组Fiber-2蛋白包被于所述酶标板上。
5.一种用于检测血清4型禽腺病毒Fiber蛋白抗体的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括包被有真核重组Fiber-1蛋白和/或真核重组Fiber-2蛋白的酶标板，所述真核重组Fiber-1蛋白和/或真核重组Fiber-2蛋白是将重组杆状病毒rBacmid-FAdV-4-Fiber-1、rBacmid-FAdV-4-Fiber-2分别感染Sf9细胞，收集细胞经重悬、破碎、离心、纯化后得到。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括阳性对照、阴性对照、HRP标记的兔抗鸡二抗免疫血清、样品稀释液、显色液及洗涤液。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为抗血清4型禽腺病毒的鸡血清，所述阴性对照为SPF鸡血清。
8.根据权利要求6所述的用于检测血清4型禽腺病毒Fiber蛋白抗体的试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液为含有0.05～0.1％Tween-20的PBS，所述显色液为TMB显色液，所述洗涤液为含有0.05～0.1％Tween-20的PBS。
9.真核重组Fiber-1蛋白和/或真核重组Fiber-2蛋白、权利要求5-9任一所述的试剂盒在检测血清4型禽腺病毒抗体的间接ELISA方法中的应用，所述真核重组Fiber-1蛋白和/或真核重组Fiber-2蛋白由Sf9昆虫表达系统表达获得。
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