[发明专利]一种神经干细胞磷脂膜微囊及其制备方法

权利要求书

1.一种神经干细胞磷脂膜微囊，主要由神经干细胞、海藻酸钠、磷脂酰胆碱和多聚赖氨酸制备而得，具体制备方法，包括以下步骤：

1)将海藻酸钠溶液与磷脂酰胆碱混合形成混合液；

2)将培养的神经干细胞加入到混合液中，形成细胞悬液；

3)将细胞悬液使用静电液滴发生器滴入氯化钙溶液中形成微珠，流速为10-50ml/h，反应完后，用生理盐水漂洗；

4)将微珠加入到多聚赖氨酸溶液中成膜，反应时间10-15分钟，用生理盐水漂洗；

5)将上步成膜后的微珠加入到柠檬酸钠溶液中液化，形成微囊化的神经干细胞悬液；

6)将磷脂酰胆碱溶解在氯仿中，形成磷脂溶液；

7)将磷脂溶液涂抹至导电玻璃表面，真空干燥；

8)取上步涂有磷脂溶液的导电玻璃两块，平行放置，中间夹一个1-2mm厚度的聚四氟乙烯框，构成密封腔室，注入步骤5)微囊化的神经干细胞悬液；

9)将电场函数发生器与密封腔室连通交流电，输入电压和频率：频率值为10Hz，幅值0.5Vpp，随后每20min增加0.5Vpp至幅值达到2.5Vpp后，保持电压2.5Vpp，直到磷脂酰胆碱进一步覆盖至微囊成膜，即得神经干细胞磷脂膜微囊。

2.如权利要求1所述的磷脂膜微囊，所述磷脂酰胆碱为L-α-磷脂酰胆碱。

3.如权利要求1所述的磷脂膜微囊，所述制备方法，步骤1)的混合溶液，海藻酸钠的浓度为1％-2％w/v，磷脂酰胆碱的浓度为5％-10％w/v。

4.如权利要求1所述的磷脂膜微囊，所述制备方法，步骤2)的细胞悬液，神经干细胞的终浓度为10⁵-10⁶/ml。

5.如权利要求1所述的磷脂膜微囊，所述制备方法，步骤3)的氯化钙溶液，氯化钙的浓度为100mmol/L。

6.如权利要求1所述的磷脂膜微囊，所述制备方法，步骤4)所述多聚赖氨酸溶液，多聚赖氨酸的浓度的为0.05-0.1％w/v。

7.如权利要求1所述的磷脂膜微囊，所述制备方法，步骤5)所述柠檬酸钠溶液，柠檬酸钠的浓度为55mmol/L。

8.如权利要求1所述的磷脂膜微囊，所述制备方法，步骤6)所述的磷脂溶液，磷脂的浓度为2mg/ml。

9.权利要求1的神经干细胞磷脂膜微囊在制造修复脑组织损伤药物中的用途。

10.如权利要求9所述的用途，所述脑组织损伤包括脑梗死、脑出血或/和脑外伤。