[发明专利]一种高产洛伐他汀红曲及其培育方法和应用

说明书

本发明公开了一种高产洛伐他汀红曲及其培育方法和应用。其培育方法为：(1)菌种活化；(2)制备一级种子液；(3)制备二级种子液；(4)发酵基质预处理；(5)接种培养。本发明培育方法能够培育得到高产洛伐他汀的红曲，并且，在高产洛伐他汀的同时，还不会发酵产生桔霉素和黄曲霉毒素B₁。

技术领域

本发明属于红曲培育技术领域，具体涉及一种高产洛伐他汀红曲及其培育方法和应用。

背景技术

红曲米又名红曲、赤曲、红米或福米，呈棕红色至暗红色，它以籼稻、粳稻和糯米等为原料，用红曲霉菌发酵而成。在中国及东南亚，红曲被广泛应用作食品着色剂、发酵剂、中药。

洛伐他汀是红曲霉培养物中具有生理活性功能的产物之一，由于其是胆固醇合成限制酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的抑制剂，可以抑制生物体内胆固醇的合成，所以近年来洛伐他汀类药物的开发一直是人们研究功能性红曲的热点。桔霉素是一种真菌毒素，具有肾肝毒性。在红曲霉发酵晚期，易产生次级代谢产物桔霉素，而且还发现有致畸作用，但并非所有的红曲菌都会产生桔霉素，日本用丛毛红曲霉，红色红曲霉，单色红曲霉生产出不含桔霉素的产品，而且桔霉素的产生与否与生产方法有关，生产工艺条件还决定桔霉素的含量，例如许赣荣等筛选得到数株低产桔霉素的红曲菌种。

目前，红曲的生产多数是以传统的开放式或半开放式固态发酵法，其生产环境卫生条件差、种子纯度低、极易感染杂菌、生产条件不易控制、成品红曲质量参差不齐。大多企业采用液固联合制曲法生产红曲，也存在很多问题，如菌种性能不佳、桔霉素超标、低温发酵能耗高等。

发明内容

针对现有技术中的上述不足，本发明提供一种高产洛伐他汀红曲及其培育方法和应用，可制备得到高产洛伐他汀的红曲。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种高产洛伐他汀红曲的培育方法，包括以下步骤：

(1)菌种活化

将冷藏的菌株接种至固体培养基，于25～30℃培养5～7天；

(2)制备一级种子液

洗脱活化后的菌种孢子，然后接种至培养基中，于25～30℃、100～200rpm/min振荡培养20～30h，制备得到一级种子液；

(3)制备二级种子液

将一级种子液接种至培养基中，于25～30℃、100～200rpm/min振荡培养40～50h，制备得到二级种子液；

(4)发酵基质预处理

控制清洗后的大米的水分含量为10～20％，然后加入营养液，于0.1～0.5mpa、100～150℃灭菌10～20min后，冷却至40～50℃，备用；

(5)接种培养

将二级种子液接种至发酵基质，于25～30℃，湿度65～70％的条件下发酵培养即可。

进一步地，步骤(1)中所述菌株的接种量为1～10％。

进一步地，菌株的接种量为5％。

进一步地，步骤(2)中所述菌种孢子的接种量为1～10％。

进一步地，菌种孢子的接种量为5％。

进一步地，步骤(3)中所述一级种子液的接种量为1～10％。

进一步地，一级种子液的接种量为10％。

进一步地，步骤(4)中所述营养液包括重量百分比的以下组分：

2～5％葡萄糖、0.1～0.5％硝酸钠、0.1～0.5％硫酸镁，余量为水。