[发明专利]一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法在审
| 申请号： | 202111167959.0 | 申请日： | 2021-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN113755487A | 公开（公告）日： | 2021-12-07 |
| 发明（设计）人： | 樊菲;杨召军;田艳维;王硕;王立东;薛帮凯 | 申请（专利权）人： | 天津津科生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京沁优知识产权代理有限公司 11684 | 代理人： | 胡妍 |
| 地址： | 300000 天津市滨海新区滨海高新区华苑*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提取 基因组 脱氧核糖核酸 方法 | ||
1.一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：将生物组织进行研磨、混匀，得到第一浑浊液，采用缓冲液清洗第一浑浊液，离心分离，倒弃上清液，得到细胞沉淀；
步骤二：向步骤一中的细胞沉淀中加入裂解液，进行混匀、裂解、孵育，直至溶液无团块，得到悬浮液；
步骤三：向步骤二中的悬浮液中加入前处理后的磁性微球，混匀，振摇吸附，在磁场上分离磁性微球并用吸管取出上清液，采用乙醇洗涤磁性微球，得到吸附微球；
步骤四：向步骤三中的吸附微球中加入TE缓冲液进行脱附，磁场下分离磁性微球获得含有脱氧核糖核酸的洗脱液。
2.根据权利要求1所述的一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法，其特征在于：所述裂解液包括以下组分：体积分数为1-4％的CHAPS、2-4mol/L的EDTA、2-4mol/L的盐酸胍或硫氰酸胍、和6-10mol/L尿素。
3.根据权利要求1所述的一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法，其特征在于：所述孵育条件为55-65℃下孵育5-30min，80-95℃加热3-10min。
4.根据权利要求1所述的一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法，其特征在于：所述生物组织包括植物组织、动物组织或细菌的一种。
5.根据权利要求1所述的一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法，其特征在于：所述磁性微球为二氧化硅、壳聚糖或琼脂糖包覆四氧化三铁制成。
6.根据权利要求5所述的一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法，其特征在于：所述磁性微球的表面进行氨基化修饰和羧基化修饰。
7.根据权利要求1所述的一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法，其特征在于：所述磁性微球的前处理包括以下步骤：将磁性微球置于离心管中，用缓冲液洗涤、摇匀，将离心管至于磁分离架上分离，并用吸管除去悬浮液。
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