[发明专利]一种顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯在线固相萃取-高效液相色谱联用检测方法

说明书

本发明公开了一种顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的在线固相萃取‑高效液相色谱联用检测方法。本发明以银离子功能化共价有机聚合物作为萃取富集介质，结合在线固相萃取‑高效液相色谱联用系统，建立顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的在线联用检测方法。本发明联合利用银离子与单双不饱和脂肪酸甲酯之间的银离子的亲和作用力、以及共价有机聚合物基质与单双不饱和脂肪酸甲酯之间的π‑π堆叠作用，实现顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的选择性萃取富集，减少样品基质的干扰，提高在线联用检测方法的分析效率。本发明方法简单，操作简便，工艺巧妙，所需仪器普及度较高，易于推广，可实现复杂实际样品中微量顺反式单双不饱和脂肪酸的高效富集和灵敏检测。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的在线固相萃取-高效液相色谱联用检测方法。

背景技术

顺反式单双不饱和脂肪酸广泛存在于食物中，其中最为人们熟知的就是反式脂肪酸（TFAs）。TFAs是一类含有一个或多个反式双键的非共轭不饱和脂肪酸。生活中常见的食物，如油炸食品、烘焙食品、乳制品、冰淇淋以及饮料等，都广泛存在着TFAs。摄入过量TFAs会对人体健康构成威胁，引发心脑血管疾病、Ⅱ型糖尿病等多种疾病，并有可能提高癌症发病率。世界卫生组织建议TFAs每日摄入量应在食物总能量的1%以下，我国卫生主管部门建议每日摄入TFAs总量不应超过2.2 g，因此，进行食物中的TFAs含量检测意义重大。TFAs检测方法多种多样，主要包括气相色谱法（GC）、液相色谱法（HPLC）、毛细管电泳法（CE）等。其中银离子液相色谱法（Ag⁺-HPLC）是常用的检测方法之一，但是其对TFAs检测存在检测响应较低，且样品中基质对TFAs检测干扰严重的问题，因此为了获得更好的检测结果，在检测前对食品样品进行有效的样品前处理至关重要。

现有的用于TFAs检测的样品前处理方法主要有Ag⁺薄层色谱法（Ag⁺-TLC）、Ag⁺固相萃取法（Ag⁺-SPE）等。其中Ag⁺-SPE是TFAs检测样品前处理领域中效果较好的方法。Ag⁺能够与不饱和脂肪酸中碳碳双键相互作用形成可逆的电荷转移复合物，其与不饱和脂肪酸的亲和作用力随着双键数量的增多而增强，随着链长的增长而减弱，并且银离子与顺式脂肪酸的亲和能力强于TFAs。

共价有机聚合物（COPs）材料具有良好的溶剂与热稳定性、可调节的孔结构、良好的可修饰性，在固相萃取领域不断得到新的应用。由于COPs良好的可修饰性，可对COPs材料加以适当的功能化，使其选择性和富集能力进一步得到提升，并拓展其在固相萃取领域中的应用潜力。由此启发，本课题组将Ag⁺固相萃取技术与COPs材料相结合，制备了银离子功能化共价有机聚合物固相萃取柱，并基于该固相萃取柱，构建在线固相萃取-高效液相色谱联用检测系统，发展一种顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的进样、萃取、富集与检测为一体的一步化检测方法，实现食品中顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的在线富集与高效检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的在线固相萃取-高效液相色谱联用检测新方法。本发明是以银离子功能化共价有机聚合物（COP_{TAPB-BPDA@SA@Ag}⁺）作为萃取富集介质装填固相萃取柱，构建在线固相萃取-高效液相色谱联用系统，发展一种顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的进样、萃取、富集与检测为一体的一步化检测方法。得益于银离子功能化共价有机聚合物与顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯之间的亲和作用与π-π堆叠作用，实现分析对象顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的萃取富集；该固相萃取方法可实现反式-9-十八碳烯酸甲酯（9t-C18:1）、顺式-9-十八碳烯酸甲酯（9c-C18:1）、反式亚油酸甲酯（9t,12t-C18:2）、顺式亚油酸甲酯（9c,12c-C18:2）及亚油酸甲酯异构体混合物（9t,12t-C18:2；9c,12t-C18:2；9t,12c-C18:2；9c,12c-C18:2）等食品中常见的顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯类化合物的高效萃取富集，实现顺反式单双不饱和脂肪酸甲酯的高效检测。