[发明专利]一种新型冠状病毒抗体检测试纸、制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种新型冠状病毒抗体检测试纸、制备方法和应用，所述试纸包括底板和沿层析方向依次设置在底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，结合垫上包含SARS‑Cov‑2重组N蛋白抗原和鸡IgY单克隆抗体；硝酸纤维素膜上沿层析方向依次设置有检测线和质控线，检测线上喷涂有鼠抗人IgG单克隆抗体，以及质控线上喷涂有兔抗鸡IgY单克隆抗体。本发明的公开的试纸制备工艺相对简单，不存在感染风险，相对安全，对生产和检测环境要求低，具有良好的敏感性和特异性，使用方便简单，尤其适用于大批量的检测场景。此外，还具有检测限低、检出率高的特点。

技术领域

本发明属抗体检测技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒抗体检测试纸、制 备方法和应用。

背景技术

体外诊断，即IVD(In Vitro Diagnosis)，是指将从人体中提取出来的样本(如 血液、体液、组织等生物样本)，使用体外检测试剂盒、试剂等对其进行检测， 从而获取有效的诊断信息，并据此进一步判断机体疾病或功能的一种较为成熟的 诊断方法。体外诊断相比于其他诊断方法的主要优势是诊断效率高、检测速度快、 成本低、可以进行大批量检测，因此可以预测体外诊断的发展方向是快速、灵敏、 大批量检测生物样品。而基于体外诊断技术发展起来的免疫层析试纸条在生物医 学检测方面同样具有快速灵敏、简便直观、成本低大批量等优点，在病例极多， 检测样本极多的大环境下具有极高的应用价值及优势，如检测传染性极高的新兴 SARS-CoV-2的新型冠状病毒。在疾病初期，可以用试纸条对疑似病例进行大批 量检测，以此来排查病毒在人群中的传播程度，进而可以有效预防病毒的大面积爆发；在疾病后期，也可以通过用试纸条检测病人的生物样本先大致判断哪些患 者已痊愈，再用其他检测方法进一步确保检测结果无误，大大提高了检测效率， 降低了检测成本。免疫层析条技术的主要原理是相应抗原和抗体会产生特异性免 疫反应，以及溶液在毛细作用力下会沿着纸板慢慢向上延展浸润。如果用抗原来 标记显色指示剂制成检测试纸条，当生物样品中(如：尿液、血液或唾液)含有 能与该抗原特异性结合的抗体物质，这种结合会使试纸条的检测区出现显色指示 剂的包覆和进而呈现出显色效果，借此来识别所检生物样品中是否含有目标被检 物质，从而达到快速检测目标被检物的目的。

目前已经发展出了Alpha、Beta、Gamma、Delta等毒株，其中Delta是迄今 为止传染性最强的变异株。这些变异毒株与原始版本相比，具有高度传染性，对 疫苗的耐药性也更强，对病毒的检测和防治带来了很大难度。

这样的情况下病毒样本亟须大量快速简单快捷的检测方法。为了满足重灾区 的巨大检测需求以及进一步有效控制病毒的反复出现，而且一些边远地区的基层 医疗条件不够完善，发展快速及时的有效诊断手段是重中之重。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种新型冠状病毒抗体检测试纸、 制备方法和应用，具体包括以下内容：

一种新型冠状病毒抗体检测试纸，包括底板和沿层析方向依次设置在底板上 的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述结合垫的一端与样品垫的一端 接触，所述结合垫的另一端与硝酸纤维素膜的一端接触，所述硝酸纤维素膜的另 一端与吸水垫接触，所述结合垫上包含SARS-Cov-2重组N蛋白抗原和鸡IgY 单克隆抗体；所述硝酸纤维素膜上沿层析方向依次设置有检测线和质控线，检测 线上喷涂有鼠抗人IgG单克隆抗体，以及质控线上喷涂有兔抗鸡IgY单克隆抗 体。

具体地，所述结合垫上包含胶体金标记的SARS-Cov-2重组N蛋白抗原和鸡 IgY单克隆抗体。

具体地，所述样品垫为玻璃纤维膜或聚酯纤维膜，所述结合物垫为玻璃纤维 膜，所述底板为聚氯乙烯胶板。

本发明还公开了一种制备新型冠状病毒抗体检测试纸的方法，包括以下步骤：

步骤1：柠檬酸三钠与氯化金三水化合物反应，得到胶体金；

步骤2：用步骤1制备的胶体金分别标记SARS-Cov-2重组N蛋白抗原和鸡 IgY单克隆抗体；