[发明专利]一种三孢布拉霉产物的提取方法及由其提取得到的三孢布拉霉产物在审
申请号: | 202111085554.2 | 申请日: | 2021-09-16 |
公开(公告)号: | CN113831208A | 公开(公告)日: | 2021-12-24 |
发明(设计)人: | 李翔宇;汪志明;黄宏飞;陆姝欢;马凡提 | 申请(专利权)人: | 嘉必优生物技术(武汉)股份有限公司 |
主分类号: | C07C7/00 | 分类号: | C07C7/00;C07C7/14;C07C11/21;C07C403/24;C12P23/00;C12P5/02;C12R1/645 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 潘登 |
地址: | 430000 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 三孢布拉霉 产物 提取 方法 得到 | ||
1.一种三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述三孢布拉霉产物的提取方法包括以下步骤:将由三孢布拉霉发酵得到的发酵液进行干燥、灭菌和酶解,得到提取物。
2.根据权利要求1所述的三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述干燥得到的干菌体的含水量为5wt%以下。
3.根据权利要求1或2所述的三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述灭菌为高压蒸汽灭菌,所述灭菌的温度为100-150℃,所述灭菌的时间为5-10min。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述酶解采用的酶包括复合蛋白酶和葡聚糖酶;
优选地,所述复合蛋白酶的的总酶活性为400-800U/mL;
优选地,所述葡聚糖酶的酶活性为0.5-10U/mL;
优选地,所述复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶;
优选地,所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的活性比值为1:1:(0.5-0.8);
优选地,所述酶解的温度为35-65℃,所述酶解的时间为12-24h。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述干燥得到的干菌体需进行稀释后再进行灭菌,所述稀释的溶剂为水;
优选地,所述稀释得到的稀释液中含水量为70-90wt%。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述酶解前还需调节pH至5-8。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述酶解后还需进行固液分离;
优选地,所述固液分离的方式为离心;
优选地,所述离心的转速为8000-10000r/min,所述离心的时间为5-20min。
8.根据权利要求7所述的三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述固液分离后还需进行萃取纯化:将分层得到的上层粗晶体采用有机溶剂萃取,脱溶,过滤,得到含类胡萝卜素的晶体;
优选地,所述萃取用有机溶剂为乙酸乙酯;
优选地,所述萃取的温度为60-70℃,所述萃取的次数在2次以上。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的三孢布拉霉产物的提取方法,其特征在于,所述三孢布拉霉产物的提取方法包括以下步骤:
(1)干燥:将由三孢布拉霉发酵得到的发酵液进行干燥,得到含水量为5wt%以下的干菌体;
(2)灭菌:先将干燥得到的产品稀释,得到含水量为80-90wt%的稀释液,再将所述稀释液进行高温蒸汽灭菌;
(3)酶解:将灭菌后的发酵液pH调节至5-8,再与碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和葡聚糖酶混合,在55-60℃下进行12-24h的酶解反应;
(4)离心分层:将酶解得到的酶解液以8000-10000r/min的转速离心5-20min,得到上层粗晶体;
(5)将上层粗晶体采用乙酸乙酯在60-70℃下萃取2次以上,脱溶,过滤,得到含类胡萝卜素的晶体。
10.一种三孢布拉霉产物,其特征在于,所述三孢布拉霉产物由如权利要求1-9中任一项所述的三孢布拉霉产物的提取方法得到;
优选地,所述三孢布拉霉产物为类胡萝卜素晶体。
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