[发明专利]一种水柏枝蒙药材的质量检测方法在审

专利信息
申请号: 202111043628.6 申请日: 2021-09-07
公开(公告)号: CN113640292A 公开(公告)日: 2021-11-12
发明(设计)人: 唐辉;李乐;袁小红;孙亚坤 申请(专利权)人: 石河子大学
主分类号: G01N21/84 分类号: G01N21/84;G01N33/15;G01N21/78;G01N30/90;G01N30/02;G01N21/31;G01N27/626
代理公司: 乌鲁木齐恒智专利商标代理事务所(普通合伙) 65102 代理人: 黄文松;李伯勤
地址: 832000 新疆维吾尔*** 国省代码: 新疆;65
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摘要:
搜索关键词: 一种 柏枝 蒙药 质量 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种水柏枝蒙药材的质量检测方法,包含取水柏枝药材样品,经性状鉴别、显微鉴别、理化检测、没食子酸定性检测、没食子酸含量测定、水分和灰分检查、浸出物检查、重金属检查步骤完成鉴别,

其特征在于:所述的显微鉴别包括粉末纤维鉴别和茎横切显微鉴别中的至少一种;

A.粉末显微鉴别:将水柏枝药材样品制成粒径250~270μm的粉末,取粉末置于载玻片上,滴加甘油醋酸试液或水合氯醛试液,盖上盖玻片,加热透化,在显微镜下观察;符合以下特征的样本是水柏枝蒙药材:

表皮细胞呈不规则状,壁厚内陷,与细胞接触位置凸起;非腺毛,多为单细胞,内含不均匀分枝状腺,成丝状,壁稍厚,具有壁疣;导管多为具缘纹孔导管,宽铁链条状,螺纹状,少见网纹导管和螺纹导管;韧皮纤维,散在或成束,多碎断,不木化;薄壁细胞,不规则多边形,有时周围盾圆,壁稍厚鲜亮;木纤维成束存在;

B.茎横切显微鉴别:

a软化:将水柏枝样品的茎放入水中浸泡4~5天,使其变软,

优选地,可用温水加快速度,需要每天换水;

b固定:将软化好的水柏枝茎切成2~3mm的小段,浸泡于FAA固定液12h以上;

所述FAA固定液为浓度65~75%乙醇15~20重量份,加入冰醋酸和甲醛各1重量份;

c脱水:将水柏枝茎小段从固定液中取出,用流水冲洗24h以上,从45~55%浓度的乙醇开始进行浸泡1~2h进行级次脱水,即,首次为从45~55%浓度的乙醇中进行浸泡1~2h,之后每次将乙醇的浓度提升8~10度,直至达到无水乙醇,每次时间为1~2h,

如不能及时进行各级脱水的,从固定液中取出水柏枝茎小段放在70%乙醇中保存;

d透明:先经1重量份二甲苯兑1.8~2.2重量份乙醇的混合液浸渍0.4~0.6h,再依次转入1重量份二甲苯兑1重量份乙醇的混合液1.8~2.2重量份二甲苯兑1重量份乙醇的混合液中浸渍0.4~0.6h,最后转入纯二甲苯中浸渍0.4~0.6h;

e浸蜡:把组织材料块放入熔化的石蜡液中浸渍2~3次,每次0.5~1.5h,放置8~15h,浸蜡时温度控制在高于石蜡熔点2~5℃;

f包埋、切片、贴片、烤片处理;

g染色:取已经干燥的切片,放于盛有二甲苯的染缸内脱蜡6~10min,脱完蜡后的切片可依次用纯乙醇1重量份与二甲苯0.8~1.2重量份的混合液,纯乙醇,浓度94~96%乙醇溶液、78~82%乙醇溶液、68~72%乙醇溶液分别洗4~6min,之后进行番红染液染色3~5h,水洗2~4s,之后依次用30~40%乙醇、45~55%乙醇、65~75%乙醇、75~85%乙醇、90%以上乙醇洗1.5~3min,固绿染色4~6s,染色后的切片用纯乙醇洗2~3次,每次10~20s,再用纯乙醇1重量份与二甲苯0.8~1.2重量份比例的混合液洗4~6min,纯二甲苯洗8~12min,洗去多余染料;

h封片:擦去材料周围多余液体,在洁净盖玻片上滴加1~2mL中性树胶,再将洁净盖玻片倾斜放下,以免出现气泡,封片后即制成永久性玻片标本,在显微镜下观察,以确定水柏枝蒙药材的真伪和品质;

所述的水分、灰分检查为:水分检查方法按照2020年版《中国药典》(四部)通则0832(烘干法)测定,不得超过8.49%,所述总灰分和酸不溶灰分检查方法按照2020年版《中国药典》(四部)通则2302测定,总灰分不得超过4.94%,样品中酸不溶灰分含量不得超过0.50%;

所述的浸出物检查为:按照2020年版《中国药典》(四部)通则2201,采用50%乙醇为溶剂以热浸法测定,样品中浸出物不得低于14.11%;

所述的重金属检查为:按照2020年版《中国药典》(四部)通则2321第一法原子吸收分光光度法和第二法电感耦合等离子体质谱法测定重金属铅、镉、砷、汞、铜含量,铅不得过5mg/kg;镉不得过0.3mg/kg;砷不得过2mg/kg;汞不得过0.2mg/kg;铜不得过20mg/kg;

水柏枝药材的质量达到以上标准时,水柏枝样本为合格的药材。

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