[发明专利]一种针对新冠病毒变异毒株Delta的融合蛋白、喷鼻式疫苗及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种针对新冠病毒变异毒株Delta的融合蛋白、喷鼻式疫苗及其制备方法和应用，属于病毒疫苗技术领域。一种针对新冠病毒变异毒株Delta的融合蛋白是刺突蛋白S、跨膜蛋白M和核衣壳蛋白N融合形成；S蛋白、M蛋白和N蛋白的编码基因依次如SEQ ID NO：1～3所示。由所述融合蛋白和佐剂混合制备的喷鼻式疫苗，具有良好的免疫原性、安全性和生物学活性，能够诱导机体产生有效抗体，从而抑制新型冠状病毒变异株Delta的生长，可有效预防感染Delta；采用喷鼻式疫苗形式，无需注射、操作简便，避免了使用注射类疫苗后会发生不良反应，而且疫苗制备方法简单、易于纯化，安全性高，疫苗可较快的应用于临床试验。

技术领域

本发明属于病毒疫苗技术领域，具体涉及一种针对新冠病毒变异毒株Delta的融合蛋白、喷鼻式疫苗及其制备方法和应用。

背景技术

SARS-CoV-2(或2019-nCoV)是新冠肺炎的致病病毒。而Delta病毒株是新冠病毒变异毒株，具有传播能力明显增强，潜伏期和隔代间期缩短，并可导致疾病严重程度增加的特点。目前，Delta变异株感染引发的新冠肺炎，还没有专门的治疗药物。面对找到治愈方法的困难，研制疫苗已成为当务之急。

现有的疫苗制作包括传统疫苗(减毒活疫苗、灭活疫苗)、亚单位疫苗、病毒载体疫苗、核酸疫苗等。其中，重组亚单位疫苗是利用微生物(抗原)的某种表面结构成分诱导机体产生不含核酸的抗体的一种疫苗。这些结构可以包括某些多糖、蛋白质或表位，但它们不包括整个病原体。在亚单位疫苗的基础上，负载纳米粒子形成纳米疫苗，这也是疫苗设计的一种流行方式。

由于Delta病毒传染性极强，致病性高的问题。全病毒结构的疫苗并不能保证其安全性，可能使接种对象产生无效抗体。无效抗体的产生往往对应对病毒感染不能起到有利作用甚至会导致依赖性感染增强现象和增强呼吸系统疾病等副作用。而单一蛋白的疫苗可能没有很好的免疫原性，或者面对同类型其他突变株感染时面临失效的风险。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种针对新冠病毒变异毒株Delta的融合蛋白、喷鼻式疫苗及其制备方法和应用，具有理想的免疫原性，产生有效抗体，能够由于Delta病毒株的预防。

本发明提供了一种针对新冠病毒变异毒株Delta的融合蛋白，所述融合蛋白是S蛋白、M蛋白和N蛋白融合形成；

所述S蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；

所述M蛋白的编码基因的核酸序列如SEQ ID NO：2所示；

所述N蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

优选的，所述融合蛋白为S-M-N融合蛋白。

优选的，所述融合蛋白中在每两个蛋白之间还包括柔性linker；

所述柔性linker的氨基酸酸序列为(GGGGS)n，其中n为整数，且1≤n≤3。

本发明提供了一种针对新冠病毒变异毒株Delta的喷鼻式疫苗，所述喷鼻式疫苗包括所述融合蛋白和佐剂。

优选的，所述融合蛋白的浓度为0.1～0.2g/L；

优选的，所述佐剂为PLGA。

优选的，所述PLGA在所述疫苗中的终浓度为1～2mg/mL。

本发明提供了所述融合蛋白在制备针对新冠病毒变异毒株Delta的疫苗中的应用。

优选的，所述疫苗为鼻喷式疫苗。