[发明专利]一种基于肝卵圆细胞恶性化的原发性小鼠肝癌模型及其建立方法和应用有效
申请号: | 202111010139.0 | 申请日: | 2021-08-31 |
公开(公告)号: | CN113999876B | 公开(公告)日: | 2023-09-05 |
发明(设计)人: | 何林烨 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N5/09;A01K67/027 |
代理公司: | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人: | 冉剑侠 |
地址: | 610041*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 肝卵圆 细胞 恶性 原发性 小鼠 肝癌 模型 及其 建立 方法 应用 | ||
1.一种基于肝卵圆细胞恶性化的原发性小鼠肝癌模型的建立方法,其特征在于:包括以下依次进行的步骤:
S1:使用原癌基因转化肝卵圆细胞,获得肝癌细胞;所述原癌基因为cMYC;
所述肝卵圆细胞由如下方法制备:首先,构建DDC小鼠模型;然后从DDC小鼠模型的肝脏组织中分离得到所述肝卵圆细胞;最后,将所述肝卵圆细胞培养于永生化培养基中,所述永生化培养基中含有10ug/L的肝细胞生长因子、20ug/L的表皮生长因子、10ug/L的白血病抑制因子、100U/mL的双抗和2mmol/L的L-谷氨酰胺;
S2:将肝癌细胞原位移植到受体小鼠的肝脏,获得原发性小鼠肝癌模型;所述受体小鼠是经过X射线辐照处理的野生型小鼠,X射线辐照处理的剂量为5.5Gy;
将肝癌细胞原位移植到受体小鼠的肝脏的方法为:在所述受体小鼠接受X射线辐照处理的第二天,向受体小鼠的肝门静脉注射所述肝癌细胞,肝癌细胞的注射量为每只小鼠106个。
2.使用权利要求1所述的一种基于肝卵圆细胞恶性化的原发性小鼠肝癌模型的建立方法所获得的原发性小鼠肝癌模型在评价基因在肝癌发生和发展过程中的作用中的应用。
3.使用权利要求1所述的一种基于肝卵圆细胞恶性化的原发性小鼠肝癌模型的建立方法所获得的原发性小鼠肝癌模型在评价具有治疗肝癌功效的药物中的应用。
4.使用权利要求1所述的一种基于肝卵圆细胞恶性化的原发性小鼠肝癌模型的建立方法所获得的原发性小鼠肝癌模型在筛选原发性肝癌治疗靶点中的应用。
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