[发明专利]靶向抑制PITPNM3的小分子抑制剂及其应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及靶向抑制PITPNM3的小分子抑制剂及其应用。本发明借助计算机辅助药物设计、高通量药物筛选出的11种具有靶向抑制PITPNM3介导细胞粘附的生物学效应和靶向抑制CCL18‑PITPNM3介导的细胞迁移粘附生物学效应的靶向抑制PITPNM3的小分子抑制剂，能够抑制各类由PITPNM3激活介导的肿瘤转移，如乳腺癌、肝细胞癌、胰腺导管癌、肺癌，具有适用范围广、靶向性强的优势。

技术领域

本发明属于生物工程及生物医药技术领域，具体涉及靶向抑制PITPNM3的小分子抑制剂及其应用。

背景技术

乳腺癌是我国女性发病率最高的恶性肿瘤，而乳腺癌转移是导致乳腺癌患者死亡的主要原因。尽管针对乳腺癌的诊治手段有了很大的进步，但依然有部分乳腺癌病人会发生癌转移，而乳腺癌远处转移是导致临床预后不佳及临床治疗失败的最主要的原因之一。同其他恶性肿瘤发生远处转移一样，其发生远处转移与肿瘤微环境密切相关。在恶性肿瘤微环境中，各种免疫细胞会发生浸润并产生各种炎症因子，这些炎症因子与周围的恶性肿瘤细胞相互联系异常激活肿瘤细胞表面信号通路，促进了肿瘤细胞的转移。因此，开发针对肿瘤微环境作用的小分子抑制剂抑制乳腺癌转移具有重要的意义。

研究表明，肿瘤微环境中，肿瘤相关巨噬细胞是数量最多的一类细胞之一，并且肿瘤相关巨噬细胞的数量与病人生存预后呈负相关的关系，更深入的研究发现肿瘤相关巨噬细胞具有促进肿瘤细胞增殖、干性并促进肿瘤细胞远处转移的重要作用。肿瘤相关巨噬细胞能够分泌多种细胞因子、生长因子等等。这些细胞因子及生长因子结合于肿瘤细胞表面的受体上，激活这些受体，异常促进下游肿瘤细胞信号转导，并使肿瘤细胞增殖及转移。例如：在肝肺等组织高表达CXCL12，其能够结合于肿瘤细胞表面CXCR4，激活肿瘤细胞下游通路，促进肿瘤细胞远处转移。

在肿瘤微环境中，CCL18能够结合于肿瘤细胞表面的膜受体PITPNM3，并激活其下游通路促进乳腺癌转移。PITPNM3与其配体CCL18结合后，磷酸化其胞内段PYK2结合域(PYK2-binding domain)结合的PYK2，使PYK2转变为p-PYK2，进一步磷酸化的PYK2使下游信号Src、FAK、AKT和ERK磷酸化，促进肿瘤细胞Snail、Vimentin、TWIST、ZEB1等转移相关蛋白和上皮-间质转化相关蛋白的表达，抑制CDH1等上皮表面标记物的表达，从而促进乳腺癌细胞的侵袭、迁移、上皮-间质转化和粘附。此外，前期研究还发现，肿瘤相关巨噬细胞能够分泌CCL18，通过激活幼稚型CD4阳性T细胞表面PITPNM3受体通路并招募其至肿瘤微环境中发挥抑制肿瘤免疫的作用。因此，PITPNM3作为CCL18的受体，在肿瘤转移及肿瘤微环境中具有非常重要的作用，针对PITPNM3设计小分子靶向药物具有抑制肿瘤转移的价值。

PITPNM3由17号染色体的PITPNM3(也被称为NIP1、ACKR6、CORD5和RDGBA3)基因编码，分子大小约108KD，全长980个氨基酸，是一个跨膜受体，主要有N末端钙离子结合结构域(acidic calcium-binding domian)和C末端PYK2结合结构域(PYK2-binding domian)，在两个结构域间的是跨膜结构和分别位于细胞内/细胞外的蛋白质螺旋；与PITPNM1/2不同的是，PITPNM3不具有磷脂酰肌醇转移结构域，能作为一个细胞趋化因子受体定位于细胞膜表面，PITPNM1/2主要定位在细胞浆以及高尔基体等细胞内结构中。PITPNM3已被证实在多种肿瘤细胞中高表达，包括乳腺癌、肝细胞肝癌、胰腺导管癌、肺癌肿瘤细胞等多种恶性肿瘤。PITPNM3在这些肿瘤的远处转移中发挥了重要的作用。我们前期研究证实肿瘤细胞上的PITPNM3能够结合肿瘤微环境中的CCL18，并激活PITPNM3下游通路，促进乳腺癌浸润和转移。

以PITPNM3为靶点的小分子抑制剂在世界范围内鲜有报道，因此本发明涉及新型靶向PITPNM3的小分子抑制剂，以期获得高效和低毒的抑制肿瘤转移的靶向药物。

发明内容