[发明专利]莫匹罗星杂质对照品的制备方法

说明书

本发明一种莫匹罗星中杂质对照品的制备方法，属于药物分析技术领域。该方法采用制备液相色谱、飞行时间质谱、核磁共振谱、冷冻干燥机、高效液相色谱等多种技术，对莫匹罗星杂质A、B、C、D、E、F六个杂质进行了分离纯化、冷冻干燥、含量检测、结构确证和标化，这六个杂质可以在莫匹罗星原料药及制剂的质量检测中作为杂质对照品。本发明提供一种莫匹罗星杂质的分离纯化方法，该方法是一种通用的莫匹罗星杂质对照品的分离方法，解决了目前莫匹罗星质量控制和杂质研究中存在的杂质对照品缺乏问题。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种莫匹罗星杂质对照品的制备方法。

背景技术

莫匹罗星(Mupirocin)是9-(((E)-4-((2S,3R,4R,5S)-3,4-二羟基-5-((2S,3S)-3-((2S,3S)-3-羟基丁烷-2-基)环氧乙烷-2-基)甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)-3-甲基丁-2-烯酰基)氧基)壬酸，为局部外用抗生素，是由荧光假单胞菌培养液产生的一种物质，即假单胞菌A。其抗菌作用主要是通过可逆性地与异亮氨酸转移RNA合成酶结合，阻止异亮氨酸渗入，中止细胞内含异亮氨酸的蛋白质合成而起到杀菌或抑菌的作用。本药在很低浓度时显示抑菌作用，在高浓度时起杀菌作用。

药物杂质与药物质量以及药物安全性密切相关，杂质的研究作为药品研究的重要方面，必将贯穿于整个药品研究的始终。莫匹罗星为皮肤和经皮吸收制剂用原料，其含有的杂质，将影响产品使用的安全性，应对产品中的杂质进行彻底研究，严格限制。因此，需要合成相应的药物杂质为药品研究提供对照品。

现有方法和文献未进行详细的杂质制备，无法提供莫匹罗星质量控制和杂质研究必须用到的杂质对照品制备方法。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明提供一种莫匹罗星杂质对照品的分离纯化方法，通过制备液相色谱进行分离纯化，冷冻干燥、结构确证和标化，获得高纯度莫匹罗星杂质对照品A、B、C、D、E、F，用于莫匹罗星原料药及制剂的质量检测与研究。

一种莫匹罗星中杂质对照品的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)取1g莫匹罗星杂质粗品于离心管中，加入乙腈及纯化水，超声振荡溶解后滤膜过滤，得到杂质母液；

2)以C₁₈填料分离纯化条件对步骤1)溶液进行洗脱，收集含莫匹罗星杂质的馏分；

3)减压蒸馏浓缩步骤2)杂质的馏分，除去乙腈，得到馏分浓缩液；

4)再以C₁₈填料分离纯化条件对馏分浓缩液进行纯化，收集纯度大于95％杂质馏分；

5)将纯度大于95％馏分混合，减压蒸馏浓缩，除去有机溶剂；

6)加入200ml二氯甲烷萃取，取有机层；

7)减压蒸馏浓缩后转移至玻璃小瓶中，用氮气吹干；

8)将玻璃小瓶放入冷冻干燥机中进行干燥，除去残留溶剂，最终得莫匹罗星杂质。

进一步地，步骤1)的乙腈和纯化水的添加量分别为，每1g莫匹罗星杂质粗品添加乙腈5-50mL，添加纯化水1-10mL。

进一步地，步骤2)的C₁₈填料分离纯化条件最佳流动相为流动相A(10.5g/L乙酸铵，pH 5.7)：B相(乙腈)＝80：20至60：40。

进一步地，步骤3)、5)和7)的减压蒸馏浓缩最佳温度为20～40℃，更佳地为30℃。

进一步地，步骤4)的C₁₈填料分离纯化条件最佳流动相为流动相A(10.5g/L乙酸铵，pH 5.7)：B相(四氢呋喃)＝75：25至65：35。