[发明专利]植物乳杆菌Y12所产胞外多糖在缓解由福氏志贺氏菌引起痢疾病症的应用

说明书

本发明公开了一种植物乳杆菌Y12所产胞外多糖在制备缓解由福氏志贺氏菌引起痢疾病症的药物中的应用，属于微生物应用技术领域。本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12于2018年8月21日，保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏号为CCTCC NO：M 2018556。本发明提供的植物乳杆菌Y12胞外多糖抑制福氏志贺氏菌的生物膜形成；抑制福氏志贺氏菌对肠上皮细胞的黏附与侵袭；缓解由福氏志贺氏菌引起的肠上皮细胞的炎症反应；降低抗生素缓解福氏志贺氏菌引起的痢疾病症的剂量。

技术领域

本发明涉及一种植物乳杆菌Y12所产胞外多糖在缓解由福氏志贺氏菌引起痢疾病症中的应用，属于微生物技术领域。

背景技术

越来越多的研究表明，福氏志贺氏菌可以形成生物膜，其能够造成长期不断的病原菌感染且难以被彻底清除。生物膜中的细菌由于受到自身分泌的胞外多聚物基质的保护，其对外界不良环境的抵抗力明显提升。在抗生素广泛应用的环境下，也逐渐产生了抗生素耐药性。该问题无论是在医疗领域还是在食品加工领域都是严重的安全问题。在微生物生长代谢过程中分泌的胞外多糖在本身不具备抑菌或杀菌作用的前提下，可以有效抑制广谱病原菌生物膜形成及毒力基因的表达，并可降低病原菌的抗生素耐药性，因此受到广泛的关注。

发明内容

本发明提供一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12，所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12于2018年8月21日，保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏号为CCTCC NO：M 2018556。

本发明还提供了一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12所产胞外多糖，植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12接种于新鲜MRS液体培养基培养，取发酵液离心，除菌体保留上清液；上清液利用旋转蒸发仪浓缩；浓缩液中加入三氯乙酸，室温下摇匀，沉淀蛋白；离心，除蛋白保留上清液；上清液加入冷无水乙醇，放置、沉淀多糖；离心，弃上清液保留多糖沉淀，并用去离子水溶解；透析，冻干，即得。

进一步地，上述技术方案中，植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12的接种量为1％-2％(V/V)；上清液利浓缩至原体积的1/5-1/4；浓缩液中加入三氯乙酸至终浓度为4％-7％，室温下摇匀30-60min；上清液与冷无水乙醇的体积比为2-3，放置、沉淀多糖的条件为2-8℃放置12h-16h；透析的条件为2-8℃，透析36-48h。

本发明还提供了所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12所产胞外多糖联合抗生素在制备用于缓解由福氏志贺氏菌引起的痢疾病症的药物或保健品中的应用。

进一步地，上述技术方案中，所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12所产胞外多糖可以降低抗生素清除福氏志贺氏菌生物膜的最低作用浓度；所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12所产胞外多糖与抗生素的浓度比例为1:18-1:20。

进一步地，上述技术方案中，所述抗生素包括左氧氟沙星、环丙沙星、头孢唑啉或四环素。

进一步地，上述技术方案中，所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12所产胞外多糖在作用浓度为0.01～0.200μg/μL时抑制福氏志贺氏菌形成生物膜。优选作用浓度为0.01、0.025、0.050、0.100、0.200μg/μL。

进一步地，上述技术方案中，所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12所产胞外多糖在作用浓度为0.050～0.200μg/μL时，抑制福氏志贺氏菌对人肠上皮细胞的黏附与侵袭。优选作用浓度为0.050、0.100、0.200μg/μL。