[发明专利]含过氧化氢酶的葡萄糖氧化酶饲料添加剂的生产方法在审
| 申请号: | 202110998083.8 | 申请日: | 2021-08-27 |
| 公开(公告)号: | CN113749187A | 公开(公告)日: | 2021-12-07 |
| 发明(设计)人: | 刘志国;战晓燕;薛德林 | 申请(专利权)人: | 辽宁威兰生物技术有限责任公司 |
| 主分类号: | A23K20/189 | 分类号: | A23K20/189;A23K50/80;A23K50/30;A23K50/60;A23K50/75;C12N9/04;C12N9/08;C12N1/14;C12R1/825 |
| 代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 马驰 |
| 地址: | 110000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 过氧化氢酶 葡萄糖 氧化酶 饲料添加剂 生产 方法 | ||
1.含过氧化氢酶的葡萄糖氧化酶饲料添加剂的生产方法,其特征在于:1)将特异青霉菌ACCC30443菌株,经酶活性诱导剂酶活性诱导固体培养基培养得到固体种子,经酶活性诱导剂酶活性诱导液体培养基在发酵罐中进行液体深层发酵培养得到种子液;2)种子液与固体发酵原料和酶活性诱导剂混合进行有氧固体发酵;3)将发酵结束后的发酵料粉碎、过筛与成品检测;得到含过氧化氢酶的葡萄糖氧化酶饲料添加剂产品;酶活性诱导剂:桔子皮粉、聚丙二醇、月桂醇聚氧乙烯醚。
2.含过氧化氢酶的葡萄糖氧化酶饲料添加剂的生产方法,其特征在于:
具体过程步骤为:
1)将特异青霉菌ACCC30443菌株,在酶活性诱导固体培养基上培养得到固体种子,再将固体种子接种到发酵罐中进行液体深层发酵培养得到种子液,其中,菌株为:特异青霉菌ACCC30443;酶活性诱导分离固体培养基组成:葡萄糖、小黄米、蛋白胨、桔皮提取液、聚丙二醇、月桂醇聚氧乙烯醚,经培养得到固体种子;酶活性诱导发酵罐液体培养基组成:蔗糖、硝酸钠、磷氢二钾、硫酸镁、氯化钾、桔皮提取液、聚丙二醇、月桂醇聚氧乙烯醚,经微生物发酵罐深层培养得到液体种子;
2)将步骤1)得到的种子液接种于固体发酵原料和酶活性诱导剂的混合物中进行有氧固体发酵;固体发酵原料组:麦麸皮,酶活性诱导剂:桔子皮粉、聚丙二醇、月桂醇聚氧乙烯醚;固体发酵全过程需要有氧发酵;
3)步骤2)发酵结束后得到的发酵料粉碎,得到含过氧化氢酶的葡萄糖氧化酶饲料添加剂产品。
3.按照权利要求2所述的含过氧化氢酶的葡萄糖氧化酶饲料添加剂的生产方法,其特征在于:采用特异青霉菌ACCC30443,酶活性诱导分离固体培养培养基组成,以重量份数计:葡萄糖5.0~7.0%、小黄米28~36g/L、蛋白胨5.0~7.0%、桔皮提取液1.0~3.0%、聚丙二醇0.001~0.005g/L、月桂醇聚氧乙烯醚0.003~0.007g/L、余量为水,固体培养96-120小时,孢子数80~100个亿/g,葡萄糖氧化酶酶活性130IU/ml~160IU/g、过氧化氢酶酶活性70IU/ml~100IU/g。
4.按照权利要求2或3所述的含过氧化氢酶的葡萄糖氧化酶饲料添加剂的生产方法,其特征在于:采用特异青霉菌ACCC30443,酶活性诱导分离固体培养培养基组成,以重量份数计:葡萄糖6.0%、小黄米32g/L、蛋白胨6.0%、桔皮提取液2.0%、聚丙二醇0.03g/L、月桂醇聚氧乙烯醚0.05g/L、余量为水;固体培养96小时,孢子数100个亿/g,葡萄糖氧化酶酶活性160IU/g、过氧化氢酶酶活性100IU/g。
5.按照权利要求2所述的含过氧化氢酶的葡萄糖氧化酶饲料添加剂的生产方法,其特征在于:采用特异青霉菌ACCC30443,酶活性诱导发酵罐液体培养基组成,以重量份数计:蔗糖5.0~7.0%、硝酸钠1.0~3.0%、磷酸氢二钾0.1~0.3%、硫酸镁0.1~0.3%、氯化钾0.1~0.3%、桔皮提取液1.0~3.0%、聚丙二醇0.003~0.007/L、月桂醇聚氧乙烯醚0.003~0.007g/L、余量为水、pH值自然;灭菌条件:温度115℃、压力0.08~0.1MPa、时间18min;培养条件:接种量0.10~0.15g/L;罐压0.03~0.05MPa、通入空气的风量100:100vvm~100:200vvm、转速30~90rpm、温度28℃~32℃;时间48~72h;葡萄糖氧化酶酶活性390IU/ml~480IU/ml、过氧化氢酶酶活性210IU/ml~300IU/ml。
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