[发明专利]一种制备生物活性肽的方法

说明书

本发明提供了一种制备生物活性肽的方法，所述方法包括以下步骤：(1)将中药药渣加入到液体发酵培养基中，然后接种桦褐孔菌进行发酵预处理；(2)发酵预处理结束后，在液体发酵培养基中补加(NH₄)₂SO₄，将液体发酵培养基的pH调节至7.0，然后接种枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌继续发酵培养，得到所述生物活性肽。该方法极大地提高发酵产品的饲用品质和效率，具有显著的经济性、环保性和高效性的特点。采用该方法制得的发酵产品适口感较好，小分子肽含量较高，将其加入到饲料中能有效降低仔猪的腹泻发病率，提高采食量和料肉比，还能有效改善饲料适口性，提高饲料转化率，提高育肥猪出栏重。

技术领域

本发明涉及一种制备生物活性肽的方法。

背景技术

近年来，代抗生素的制剂有很多，其中生物活性肽在生物体内无抗原性，食用安全性高，其抑菌特性可减少抗菌药的使用，已成为“无抗”养殖饲料的研究热点。生物活性肽由2-20个氨基酸组成，分子质量6KD以下，氨基酸组成和序列决定其活性功能。在动物生产中能够改善饲料适口性、优化动物生产性能。在农村农业部开展兽用抗菌药减量化使用工作的背景下，为提高畜禽生产性能和效益，开发利用活性肽作为饲料添加剂或药物将给养殖行业创造出巨大的价值，是推动“无抗”养殖的重要途径。

目前，生产获取食源性生物活性肽的工艺方法主要分为3种：酶水解法、微生物发酵法和人工合成法。

①酶法制备生物活性肽。酶法合成生物活性肽，其产品安全性极高，生产条件温和，水解易控制，可定位生产特定的肽，成本低，已成为最主要的生产方法之一。利用蛋白酶制备生物活性肽可以使多肽产品具有良好的溶解性、耐酸和耐热及较高的速溶性等优点。然而，在酶解过程中某种蛋白质会产生苦味肽，影响了生物活性肽的实际应用。

②人工合成法制备生物活性肽。经典固相多肽合成法主要是将带有氨基保护基团的氨基酸的羧基端固定到不溶性树脂上，脱去该氨基酸上的氨基保护基，同下一个氨基酸的活化羧基形成酯键，从而将肽链延伸形成多肽。多肽固相合成法经过不断改进和完善，已经广泛用于多肽和蛋白质的研究领域，尤其是短肽的合成。而其主要的缺点表现为直接合成的序列短、耗时、合成效率和纯度低、成本高及合成试剂的毒性大等。

③微生物发酵法制备生物活性肽。微生物发酵法是利用微生物自身分泌的胞外酶将发酵底物蛋白质分解的过程。其较酶法相比减少了蛋白酶的纯化和制备过程。微生物法作为一种新的制备生物活性肽的方法，具有微生物蛋白酶来源广、酶产量高、生长周期短及生产成本低等优越性。与此同时，利用微生物法可以直接生产脱苦的活性肽，这样可以使蛋白质的水解以及多肽的脱苦同步进行，实现一步法制备多肽，大大降低了成本。微生物不仅可以直接发酵制备生物活性肽，而且可以提供廉价的商品酶，为生物活性肽的制备创造了良好的条件。但该方法也存在一定的缺点：很多优良的产酶菌株被证明是有毒或是有害，因此存在一定的安全问题。如何将新技术交叉应用到微生物发酵法制备生物活性肽的研究，开发出新的产品，利用肽类药物和功能性饲料具有天然、无副作用等特点，进行家畜的无抗养殖，以提高人们的生活质量。不但符合健康中国发展理念，而且给企业带来的经济效益也是不可估量。

发明内容

本发明基于对多菌分步发酵预中药药渣产生物多肽的方法探索研究结果，提供了一种制备生物活性肽的方法。

为实现上述目的，所采取的技术方案：一种制备生物活性肽的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)将中药药渣加入到液体发酵培养基中，然后接种桦褐孔菌进行发酵预处理；

(2)发酵预处理结束后，在液体发酵培养基中补加(NH₄)₂SO₄，将液体发酵培养基的pH调节至7.0，然后接种枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌继续发酵培养，得到所述生物活性肽。

优选地，所述步骤(1)中中药药渣包括补气益气类中药药渣。