[发明专利]一种适用于链霉菌的强启动子及其应用

说明书

本发明公开了一种适用于链霉菌的强启动子及其应用，涉及基因工程和微生物代谢工程领域，强启动子的核苷酸序列包括(a)序列、与(a)序列具有75％以上一致性，且具有启动子功能的(b)序列或者在高严谨条件下与(a)序列或(b)序列杂交且具有启动子功能的(c)序列；包含该强启动子的质粒载体；包含该质粒载体的宿主细胞包括白色链霉菌、变铅青链霉菌、天蓝色链霉菌和委内瑞拉链霉菌；包含该强启动子、质粒载体和宿主细胞在启动目的基因表达的应用。该强启动子可以应用于常用的链霉菌模式菌株，对来源于放线菌的重要蛋白质包括酶和重要代谢产物的高产具有重要意义。

技术领域

本发明涉及基因工程和微生物代谢工程领域，尤其涉及一种适用于链霉菌的强启动子及其应用。

背景技术

启动子是位于基因转录单元上游的一段特殊DNA序列，具有启动基因转录的功能，并在调控基因转录水平中发挥着重要的作用。代谢工程常常需要表达外源基因或者调控内源基因的表达，而启动子的选择对基因的表达调控至关重要。启动子影响基因的转录水平，影响人工合成途径或本源途径中各基因间协调性，继而影响菌株的代谢功能。为了提高目的物产量，代谢工程中常用的手段是利用强启动子过量表达合成代谢途径中关键酶的编码基因。根据启动子类型可分为两种，即诱导型启动子和组成型启动子。诱导型启动子在诱导表达过程中需添加诱导剂，但诱导剂通常比较昂贵，不适于大规模生产，细胞对诱导剂感应存在非均一性，还可能对细胞具有一定的毒性。组成型启动子不需要诱导等特殊条件即可在菌体存活期持续不断地表达外源基因，从而简化了操作过程，且具有相对较高的安全性，因此更适合在实际生产中应用。

链霉菌，革兰氏阳性菌，属于细菌域(原核生物界)、厚壁菌门、放线菌纲、放线菌亚纲、放线菌目、链霉菌亚目、链霉菌科。链霉菌具有广泛的代谢和生物转化能力，能够分解和利用土壤中的各种有机物质，在自然界的物质循环中起重要的作用，也是一种重要的工业微生物。约60％具有商业和医学用途的抗生素是由链霉菌产生的，抗肿瘤的博莱霉素、丝裂霉素，抗真菌的制霉菌素，抗结核的链霉素，用作抗螨虫剂的抗霉素A，能有效防治水稻纹枯的井冈霉素等，都是链霉菌的次生代谢产物。