[发明专利]一种适用于链霉菌的强启动子及其应用

权利要求书

1.一种适用于链霉菌的强启动子，其特征在于，所述强启动子的核苷酸序列包括(a)、(b)或(c)序列，所述(a)序列如序列表SEQ ID NO:1所示；

所述(b)序列为：与所述(a)序列具有75％以上一致性，且具有所述强启动子功能的核苷酸序列；

所述(c)序列为：在高严谨条件下与所述(a)序列或所述(b)序列杂交且具有所述强启动子功能的所述核苷酸序列。

2.如权利要求1所述的强启动子，其特征在于，所述(a)序列是以绒毛链霉菌(Streptomycesflocculus)为模板，扩增获得；所述绒毛链霉菌包括绒毛链霉菌CGMCC4.1223；所述扩增的引物对为引物stnK4p-F和引物stnK4p-R；所述引物stnK4p-F的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示；所述引物stnK4p-R的核苷酸序列如序列表SEQ IDNO:3所示。

3.如权利要求1所述的强启动子，其特征在于，所述(b)序列包括与所述(a)序列的核苷酸序列具有85％、90％或95％以上同一性，且具有所述强启动子功能的所述核苷酸序列。

4.一种含有权利要求1、2或者3任一项所述强启动子的质粒载体，其特征在于，所述质粒载体为游离型载体或整合型载体，所述游离型载体为含有革兰氏阳性菌均可识别的复制子和oriT基因的广泛宿主穿梭质粒载体；所述整合型载体为含噬菌体整合酶基因int位点和oriT基因的广泛宿主穿梭质粒载体。

5.如权利要求4所述的质粒载体，其特征在于，所述游离型载体包括pJTU1278质粒载体，所述整合型载体包括pSET152质粒载体。

6.一种含有权利要求4或者5任一项所述的质粒载体的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为链霉菌，所述链霉菌包括白色链霉菌(Streptomyces albus)、变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)、天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)或委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuelae)。

7.如权利要求1、2或者3任一项所述的强启动子在启动目的基因表达的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述目的基因包括3-羟基邻氨基苯甲酸的生物合成基因；在所述3-羟基邻氨基苯甲酸的生物合成基因前面插入所述强启动子以启动所述3-羟基邻氨基苯甲酸的生物合成基因的表达。

9.如权利要求4或者5任一项所述的质粒载体在启动目的基因表达的应用。

10.如权利要求6所述的宿主细胞在启动目的基因表达的应用。