[发明专利]一种CGC杂化纳米复合物及其制备方法和应用

权利要求书

1. 一种Con A-GOx-Ca₂（PO₄）₃杂化纳米复合物，其特征在于，所述纳米复合物是将伴刀豆球蛋白A、葡萄糖氧化酶及Ca²⁺ 离子溶于PBS缓冲溶液后通过一锅法合成；其制备方法包含以下步骤：

S1.将500～1500 μL 10 mM PBS缓冲溶液、50～200 μL 0.1 mg/mL 伴刀豆球蛋白A、50～200 μL 0.1 mg/mL葡萄糖氧化酶及10～100 μL 100～500 mM CaCl₂溶液混匀，室温下静置16～24 h，至产生白色絮状沉淀物；

S2.将混合溶液在室温下，8000～12 000 rpm离心3～5 min后，去除上清液，加入1～5mL 0.1～10 mM PBS缓冲溶液洗涤、离心，即得。

2. 一种检测大肠杆菌O157: H7的方法，其特征在于，包含以下步骤：

S1.将大肠杆菌O157: H7抗体磁珠用PBS缓冲液洗涤后悬浮备用；

S2.将步骤S1所得抗体磁珠悬浮液、待测样品以及权利要求1所述的Con A-GOx-Ca₂（PO₄）₃杂化纳米复合物混合孵育，形成“磁珠-靶标-CGC”结合的三明治夹心结构，用PBS缓冲液洗涤备用；所述抗体磁珠、大肠杆菌O157: H7及纳米复合物CGC的孵育温度为25℃～55℃，孵育时间为20～60 min；所述PBS缓冲液的pH值为4.5～8.5；

S3.取适量β-D-葡萄糖溶液加入S2所述夹心结构中混匀反应，反应后将磁珠吸附，吸取上清液滴加在H₂O₂试纸条上，反应10～60 s后进行结果判别。

3. 根据权利要求2所述方法，其特征在于，步骤S2中抗体磁珠悬浮液的用量为1～6 μL，待测样品的用量为10～100 μL，Con A-GOx-Ca₂（PO₄）₃杂化纳米复合物的用量为1～10 μL。

4. 根据权利2所述方法，其特征在于，步骤S3中，β-D-葡萄糖溶液的浓度为10～60 mM。