[发明专利]一种HPV33类病毒颗粒的核酸适配体HPV3301及其应用

说明书

本发明涉及一种HPV33类病毒颗粒的核酸适配体HPV3301及其应用，该核酸适配体HPV3301的序列为：5'‑TAGGCGTTGCTCCCCTTCGTCCCCC CTTTAGCGCAGCCCCCCCCAATACGTTCTCTTGTCCTCTCGAGGTTGTTACGC‑3'；本发明的核酸适配体HPV3301能高亲和力、高特异性地与HPV33类病毒颗粒结合，该核酸适配体HPV3301在HPV33感染的诊断和治疗方面具有广阔的应用前景和重要的科学、社会价值，特别是它具有阻断HPV33感染的作用，可作为潜在的HPV33感染治疗药物。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种与HPV33类病毒颗粒特异性结合的高亲和力核酸适配体HPV3301及其应用。

背景技术

人乳头瘤病毒(Human Papilloma Virus，HPV)是一种无被膜包被的环状双链DNA病毒。目前，HPV已被发现的有200多种型别，大部分型别感染人体后不表现出明显的症状，少数部分型别有病毒感染的表现，例如引起皮肤的多种乳头状瘤或疣及生殖道上皮增生性损伤。依据WHO国际癌症研究机构(IARC)及其他国际组织的研究成果，国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心发布的《人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测及基因分型、试剂技术审查指导原则》将HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59和HPV68列为高危型别，HPV26、HPV53、HPV66、HPV73、HPV82列为中等风险型别。其中高危型与宫颈癌的发生关系密切，是女性的主要致癌因素之一。

目前缺乏有效的HPV抗病毒治疗是全世界的共识。虽然现在已经有一些抗病毒药物上市，例如核苷类抗病毒药物和干扰素，但是疗效都不确切，甚至根本没有疗效。目前也没有开发出专门针对HPV的抗病毒疗法。因此，所有关于HPV预防和治疗的指南中，都没有提到过(或推荐)使用任何药物来杀灭HPV病毒。因此迫切需要安全、有效的治疗HPV感染的药物。

适配体又被称为“合成抗体”、“化学抗体”，其化学本质是一条单链寡核酸分子(ssDNA或RNA)折叠成特定三维结构与靶物质高亲和力和高特异性结合。适配体的获得是通过指数富集配体的系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponentialenrichment，SELEX)的体外筛选过程。核酸适配体具有高亲和力、高特异性、可体外合成、可通过修饰改变其功能及药代动力学特性、无免疫原性、经济等特点。基于上述优势开发的核酸适配体药物可特异性阻断靶标的生物功能，例如作为病毒的感染阻断剂、毒素的中和拮抗剂、细胞因子的抑制剂、阻断转录因子的肿瘤治疗药物等。

类病毒颗粒与病毒结构高度一致，为去除病毒遗传物质之后剩余物质重新进行装配，结构上仍具有原病毒特征，但无自我复制能力。类病毒颗粒能使人产生针对该病毒的免疫应答，从而产生抗体使人对该病毒的侵蚀具有很好的防御能力。现有的第一代和第二代宫颈癌疫苗，均使用类似于HPV天然病毒颗粒的“类病毒颗粒”作为疫苗抗原。此外，HPV类病毒颗粒还被作为感染模型，广泛用于筛选抗HPV感染药物研究领域。目前，有研究筛选出HPV16类病毒颗的核酸适配体，并发现具有潜在的抑制HPV16感染的作用。但由于HPV各型之间存在差异，甚至一种HPV类病毒颗粒疫苗只能预防一种HPV型别。因此，筛选出高特异性、高亲和力结合HPV33类病毒颗粒的核酸适配体作为高危型HPV33感染的阻断剂具有重要的科研和临床价值。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种具有高特异性和高亲和力的HPV33类病毒颗粒的核酸适配体HPV3301；本发明的另一目的在于提供所述核酸适配体HPV3301在制备样品中HPV33类病毒颗粒的分离富集试剂中、在制备HPV33检测试剂或试剂盒中以及在制备HPV33感染阻断药物中等多方面的应用。

本发明的目的通过如下技术方案实现：一种HPV33类病毒颗粒的核酸适配体HPV3301，它的序列如下所示：