[发明专利]一种基于金纳米粒子放大QCM信号检测5-羟甲基糠醛的方法

权利要求书

1.一种基于金纳米粒子放大QCM信号检测5-羟甲基糠醛的方法，其特征在于，所述方法为将ssDNA功能化的金纳米粒子用于QCM传感器中检测5-羟甲基糠醛含量，所述ssDNA序列为SH-(CH₂)₆TTTTTTTTTTCCACCATCACCAACTAT(A)rGGAAGAGATGTTTGGTGG。

2.根据权利要求1所述基于金纳米粒子放大QCM信号检测5-羟甲基糠醛的方法，其特征在于，所述ssDNA功能化金纳米粒子的制备包括如下步骤：将过量的BSPP加入到金纳米粒子溶液中，孵育过夜，得到BSPP保护的金纳米粒子溶液，加入ssDNA，避光反应，再加入PEG-800反应，离心分离，清洗，将沉淀复溶于Tris-NaCl缓冲溶液中得到AuNPs-ssDNA溶液。

3.根据权利要求2所述基于金纳米粒子放大QCM信号检测5-羟甲基糠醛的方法，其特征在于，所述ssDNA的初始浓度为10～12μM。

4.根据权利要求1所述基于金纳米粒子放大QCM信号检测5-羟甲基糠醛的方法，其特征在于，所述QCM传感器的制备包括如下步骤：将预处理过的QCM金片装入测量池内，用Tris-NaCl缓冲溶液作为流动相冲洗QCM金片至QCM频率稳定，通入已在室温下孵育好的捕获探针DNA和还原剂三(2-甲酰乙基)膦的混合液反应，用Tris-NaCl缓冲溶液冲洗金片至QCM频率稳定，通入6-巯基己醇溶液，用Tris-NaCl缓冲溶液冲洗QCM金片至频率信号稳定，所述捕获探针DNA的序列为SH-(CH₂)₆-TTTTTTTTTTCCACCA AACATCTCTTCCT。

5.根据权利要求4所述基于金纳米粒子放大QCM信号检测5-羟甲基糠醛的方法，其特征在于，所述捕获探针DNA与还原剂三(2-甲酰乙基)膦的摩尔浓度比为1:2.5～5，所述混合液反应的时间为60～90min。

6.根据权利要求1所述基于金纳米粒子放大QCM信号检测5-羟甲基糠醛的方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：将氨基修饰的DNA链、醛基修饰的DNA链和HMF加入到离心管中，水浴反应，加入AuNPs-ssDNA溶液和Mg²⁺缓冲溶液水浴下继续反应，离心分离，沉淀溶解于Tris-NaCl缓冲液中，将其通入QCM测量池中进行检测5-羟甲基糠醛的含量，所述氨基修饰的DNA链的序列为CATCTCTTCTCCGAGCCGGTCGNH₂，所述醛基修饰的DNA链的序列为CHO-AAATAGTTGGTCGCTGGGGGGCTGACC。

7.根据权利要求6所述基于金纳米粒子放大QCM信号检测5-羟甲基糠醛的方法，其特征在于，所述氨基修饰的DNA链、醛基修饰的DNA链、HMF、AuNPs-ssDNA溶液和Mg²⁺缓冲溶液的体积比为18～12:12:25:10:135，所述水浴反应的温度为37℃，反应时间为90～120min，所述继续水热反应的时间为60～90min，所述Mg²⁺缓冲溶液为：10mM Tris-HCl、0.2M NaCl、0.02MMgSO₄，pH为7.4。