[发明专利]钩藤中四种生物碱含量的测定方法

说明书

本发明属于药物分析技术领域，公开了钩藤中四种生物碱含量的测定方法。该测定方法，包括以下步骤：(1)制备钩藤总碱供试液；(2)向步骤(1)制备的钩藤总碱供试液中加入内标物，然后装入核磁管内，进行定量核磁共振氢谱测试，分别对内标物和四种生物碱的选定信号进行积分；(3)利用公式进行计算，分别得出四种生物碱在钩藤总碱中的含量。本发明采用定量氢核磁分析技术对钩藤中四种生物碱含量进行测定，不需要以标准对照品制备工作曲线，使用已知普通化学物质为参比即可，能够大大节省测试成本；且样品测试前处理简单，测试时间短，测定结果具有良好的线性、灵敏度、精密度和准确度。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及钩藤中四种生物碱含量的测定方法。

背景技术

钩藤作为传统中药，具有息风定惊、清热平肝的功效，用于肝风内动、惊痫抽搐、高热惊厥、感冒夹惊、小儿惊啼、妊娠子痫和头痛眩晕。钩藤为茜草科植物钩藤Unacariarhynchophylla(Miq.)Miq.ex Havil.、大叶钩藤Uncaria macrophylla Wall.、毛钩藤Uncaria hirsuta Havil.、华钩藤Uncaria sinensis(Oliv.)Havil.或无柄果钩藤Uncariasessilifructus Roxb.的干燥带钩茎枝，其中以钩藤Unacaria rhynchophylla(Miq.)Miq.ex Havil.最常用。钩藤总碱是中药钩藤的重要活性成分，主要由钩藤碱、异钩藤碱为代表的吲哚类生物碱组成。钩藤碱、异钩藤碱为代表的吲哚类生物碱是钩藤质量控制的指标性成分。

目前，中药钩藤中四种生物碱—钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱和异柯诺辛碱的含量主要以高效液相色谱法配备以DAD为主的各类检测器，或者串联质谱检测器进行测定。采用高效液相色谱法虽然具有较高准确性，但是需要以纯度高、价格昂贵的标准品制备工作曲线，再进行测定，且在测定前一般需要对样品进行前处理，测试过程也较为复杂，包括平衡仪器，制备工作曲线，样品测试等，总体测试时间长，试剂消耗多。

因此，亟需提供一种测定方法简单、耗时短、准确性高的，用于测定钩藤中四种生物碱含量的方法。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出钩藤中四种生物碱含量的测定方法，其测定方法简单、耗时短、准确性高。

本发明第一方面提供了钩藤中四种生物碱含量的测定方法。

所述钩藤中四种生物碱为钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱和异柯诺辛碱，其结构式如下：

钩藤碱的结构式：

异钩藤碱的结构式：

柯诺辛碱的结构式：

异柯诺辛碱的结构式：

具体的，钩藤中四种生物碱含量的测定方法，包括以下步骤：

(1)取钩藤样品制备钩藤总碱供试液；

(2)向步骤(1)制备的钩藤总碱供试液中加入内标物，然后装入核磁管内，进行定量核磁共振氢谱测试，分别对所述内标物和所述四种生物碱的选定信号进行积分；

(3)利用公式C_X＝100％×(S_X×m_I.S×M_X)/(S_I.S×M_I.S×m_TA)计算，分别得出待测生物碱在钩藤总碱中的含量；

其中：C_X是待测生物碱在钩藤总碱中的含量，