[发明专利]钩藤中四种生物碱含量的测定方法

权利要求书

1.钩藤中四种生物碱含量的测定方法，所述四种生物碱为钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱和异柯诺辛碱，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取钩藤样品制备钩藤总碱供试液；

(2)向步骤(1)制备的钩藤总碱供试液中加入内标物，进行定量核磁共振氢谱测试，分别对所述内标物和所述四种生物碱的选定信号进行积分；

(3)利用公式C_X＝100％×(S_X×m_I.S×M_X)/(S_I.S×M_I.S×m_TA)计算，分别得出待测生物碱在钩藤总碱中的含量；

其中：C_X是待测生物碱在钩藤总碱中的含量，

S_X和S_I.S分别是所述钩藤样品中待测生物碱和内标物定量峰的积分面积，

M_X和M_I.S分别是所述钩藤样品中待测生物碱和内标物定量峰的摩尔分子量，

m_TA和m_I.S分别是所述钩藤样品中待测生物碱、钩藤总碱和内标物的质量。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，在步骤(1)中，制备钩藤总碱供试液的过程为：将钩藤样品粉碎，采用酸溶液提取，然后调节pH为碱性，再用有机溶剂萃取，干燥，制得钩藤总碱，最后将所述钩藤总碱溶于氘代溶剂中，制得钩藤总碱供试液。

3.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于，所述碱性为pH值为8-11。

4.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于，所述氘代溶剂选自氘代苯、氘代乙腈、氘代丙酮、氘代二甲亚砜或氘代吡啶中的一种。

5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述内标物为3,4,5-三甲氧基苯甲醛。

6.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(2)中所述选定信号为NH信号，并以所述NH信号为定量峰。

7.根据权利要求6所述的测定方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱和异柯诺辛碱的NH信号峰分别位于δ_H 10.11s、δ_H 10.32s、δ_H 10.13s和δ_H10.33s。

8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，在步骤(2)中，采用t1ir脉冲确定各定量峰的纵向弛豫时间，所述钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱和异柯诺辛碱的纵向弛豫时间分别为0.99s、0.99s、1.40s、1.11s，所述内标物的纵向弛豫时间为2.33s。

9.根据权利要求8所述的测定方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述参数还包括弛豫延迟时间为8-13s。

10.权利要求1-9中任一项所述的测定方法在制备钩藤药物中的应用。