[发明专利]一种虫蛀款冬花的鉴别方法在审
申请号: | 202110911206.X | 申请日: | 2021-08-09 |
公开(公告)号: | CN113686912A | 公开(公告)日: | 2021-11-23 |
发明(设计)人: | 巢志茂;徐博;吴翠;李卓俊;宋平平 | 申请(专利权)人: | 中国中医科学院中药研究所 |
主分类号: | G01N24/08 | 分类号: | G01N24/08;G01N1/28;G01N1/38 |
代理公司: | 北京元理果知识产权代理事务所(普通合伙) 11938 | 代理人: | 饶小平 |
地址: | 100700 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 虫蛀 款冬花 鉴别方法 | ||
1.一种虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,包括:
(1)选择害虫蛀蚀款冬花后的排泄物作为样品1、被虫蛀的款冬花作为样品2、未被虫蛀的质量合格的款冬花作为样品3,分别称取若干份所述样品1、样品2和样品3的粉末,做如下处理以建立模型:
向样品粉末中加入甲醇,制备提取物干浸膏;向所述提取物干浸膏中加入氘代甲醇,超声溶解,过滤至核磁管中,通过核磁共振仪采集样品的自由衰减信号;将所述自由衰减信号进行傅里叶转换得1H-NMR图谱,将化学位移分段积分,积分中除去氘代甲醇峰及残余水峰,得到积分数据;将所述积分数据基于峰面积归一化处理,得到化学位移积分段与积分值一一对应的数据矩阵;基于所述数据矩阵采用如下方法中的至少一种建立模型:主成分分析、聚类分析、偏最小二乘法-判别分析、正交偏最小二乘法-判别分析;
(2)当步骤(1)所建立的模型有效时,鉴别待测样品:
将待测样品与所述样品1、样品2和样品3一起再次按照步骤(1)所述的方法建立模型,当模型结果中所述待测样品与所述样品3归为一类时,得出所述待测样品为未被虫蛀的质量合格的款冬花,当模型结果中所述待测样品与所述样品2归为一类时,得出所述待测样品为被虫蛀的款冬花。
2.根据权利要求1所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,用于建立模型的样品1、样品2和样品3的粉末各取3份,所述粉末为过5号筛得到。
3.根据权利要求1所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,在步骤(1)中,制备提取物干浸膏的方法包括:
向样品粉末中加入甲醇,超声,静置冷却至室温,定容,过滤,减压浓缩,得到所述提取物干浸膏。
4.根据权利要求3所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,每1.0g样品粉末,定容至25mL;超声时间为30min。
5.根据权利要求1所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,在步骤(1)中,向每1g样品粉末制备得到的提取物干浸膏中加入1mL氘代甲醇,使用0.45μm微孔滤膜过滤。
6.根据权利要求1所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,在步骤(1)中,通过核磁共振仪采集样品的自由衰减信号,采集参数如下:采集频率400或600MHz,傅里叶变换0.122Hz,脉冲序列zg30,脉冲间隔1.00s,测定温度294.7K,采样时间域66k,采样时间4.09s,扫描次数16次,谱宽8012Hz,TMS为内标,氘代甲醇锁场。
7.根据权利要求1所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,在步骤(1)中,将所述自由衰减信号导入MestReNova软件中进行傅里叶转换得1H-NMR图谱,相位自动修正、基线调整,以内标物TMS为基准校正化学位移。
8.根据权利要求1所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,在步骤(1)中,对δ8.00~0.00ppm区间以每0.04ppm作为积分单元进行分段积分。
9.根据权利要求1所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,在步骤(1)中,将所述数据矩阵导入SIMCA-p13.0软件中建立模型。
10.根据权利要求1所述的虫蛀款冬花的鉴别方法,其特征在于,在步骤(2)中,判断所建立的模型是否有效的条件为:
当采用主成分分析、偏最小二乘法-判别分析、正交偏最小二乘法-判别分析的方法建立模型时,判断所建立的模型有效的条件为:模型结果将样品1、样品2和样品3各自聚成一类,分布在3个不同的区域,区域之间界限清晰,无相互重叠,且R2X>0.6,Q2>0.6;
当采用聚类分析的方法建立模型时,判断所建立的模型有效的条件为:模型结果将样品1、样品2和样品3各自聚成一类。
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