[发明专利]一种基于PCR法的多种型别登革病毒引物组及应用该引物组的试剂盒

说明书

本发明提供了一种基于PCR法的多种型别登革病毒引物组，所述多种型别登革病毒引物组至少包括登革病毒I型引物组、登革病毒II型引物组、登革病毒III型引物组、登革病毒IV型引物组中的两种或两种以上；所述登革病毒I型引物组由第一引物组、第二引物组组成，所述登革病毒II型引物组由第三引物组、第四引物组组成，所述登革病毒III型引物组由第五引物组、第六引物组组成，所述登革病毒IV型引物组由第七引物组、第八引物组组成。本发明在试剂盒中采用登革病毒I型引物组、登革病毒II型引物组、登革病毒III型引物组、登革病毒IV型引物组中的两种或两种以上，使试剂盒具有快速、特异性及灵敏度高、成本相对低等优点。

技术领域

本发明涉及一种病毒检测引物组，特别是涉及一种于PCR法的多种型别登革病毒引物组及应用该引物组的试剂盒。

背景技术

登革病毒(Dengue virus,DENV)属黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus)，是有包膜的单股正链RNA病毒，其核酸结构由三种结构蛋白加一个脂蛋白包膜和七种非结构蛋白组成。登革病毒根据其抗原性不同可分为4种血清型(DENV I、II、III、IV)，能诱导机体产生异源性抗体。

登革热(Dengue fever)是携带登革病毒的蚊媒埃及伊蚊(Aedesaegypti)或白纹伊蚊 (Aedesalbopictus)叮咬人体导致人出现发热、皮疹、淋巴结肿大、肌肉关节痛和白细胞减少等症状的急性传染病。临床上将登革热临床症状由轻至重分为登革热、登革出血热和登革出血综合征。后两种重症登革热可致出血、器官损伤、休克甚至死亡。

登革热人群普遍易感，目前尚未研发出有效疫苗，其广泛流行于全球热带与亚热带的100 多个国家和地区。据世界卫生组织统计，每年全球约有25亿人口遭受登革热的健康威胁，约5100 万人感染登革热病毒，并造成近25000人死亡，登革热已被世卫组织列为2019全球十大健康威胁之一。

我国南方属亚热带地区，毗邻东南亚登革热疫区国家，白纹伊蚊分布广泛，是登革热疫情的高危爆发流行地区。1978-2017年间广东地区总计报告登革热病例72万余例。广东历史上经历过三次大规模暴发事件，第一次为1980年，报告病例45万余例，第二次为1986年，报告病例近12万例，第三次为2014年，报告病例超过4.5万例。2013年以来，广东省加强输入病例监测及检测后每月均有检测到输入病例，其输入来源地主要为东南亚国家及非洲和南美洲地区的部分国家，而本地暴发病例也越来越频繁，已经没有早期蚊媒越冬的间歇期，提示广东省登革热的疫情形势将愈发严峻。可见，登革热已给广东省的卫生经济带来不可忽视的巨大影响，并带给当地人民严重的身心健康和生命安全威胁，已成为广东当地重点防控的虫媒传染病，也是我国南方地区最严重的虫媒传染病。

登革热疫情会在未来给我国造成更大的公共卫生威胁。因此，开发出一种针对四种型别登革热的迅速、有效的新型实验室检测及可用于病毒溯源的试剂盒，对于疫情防控有重要的应用意义。不仅能准确迅速获得流行株系基因组序列，对登革热的应急检测和研究病毒的分子变异的规律，实现更高效的登革热预警防控有重要的应用意义，也有较高的产业价值。

发明内容

本发明提供了一种基于PCR法的多种型别登革病毒引物组及应用该引物组的试剂盒，以提高对登革病毒的特异性及灵敏度。

本发明提供了一种基于PCR法的多种型别登革病毒引物组，所述多种型别登革病毒引物组至少包括登革病毒I型引物组、登革病毒II型引物组、登革病毒III型引物组、登革病毒IV型引物组中的两种或两种以上；所述登革病毒I型引物组由第一引物组、第二引物组组成，所述登革病毒II型引物组由第三引物组、第四引物组组成，所述登革病毒III型引物组由第五引物组、第六引物组组成，所述登革病毒IV型引物组由第七引物组、第八引物组组成；