[发明专利]一种肿瘤细胞的细胞核分选装置、分选方法及检测方法

权利要求书

1.一种肿瘤细胞的细胞核分选装置，其特征在于，包括分选装置本体；所述分选装置本体沿长度方向的一端设有进液口，另一端设有出液口，所述分选装置本体内沿宽度方向设有多个腔室，多个所述腔室靠近所述进液口的一端分别与所述进液口连通，多个所述腔室靠近所述出液口的一端分别与所述出液口连通；

每个所述腔室内沿所述分选装置本体的长度方向依次设有多个微单元，所述微单元包括流路和捕获通道，相邻两个所述微单元通过所述流路连通，所述捕获通道设置在所述流路的进口端，所述捕获通道的前端朝向所述流路的进口端设置，所述捕获通道的后端朝向所述流路的出口端设置，且所述捕获通道的前端宽度大于后端宽度。

2.根据权利要求1所述的一种肿瘤细胞的细胞核分选装置，其特征在于，

所述捕获通道的前端宽度为5～200um；

所述捕获通道的后端宽度为1～30um；

所述捕获通道前端至后端的距离为10～200um；

所述捕获通道的厚度为10～200um。

3.根据权利要求2所述的一种肿瘤细胞的细胞核分选装置，其特征在于，

所述捕获通道的前端宽度为20～70um；

所述捕获通道的后端宽度为1～10um；

所述捕获通道前端至后端的距离为20～70um；

所述捕获通道的厚度为20～70um。

4.根据权利要求1所述的一种肿瘤细胞的细胞核分选装置，其特征在于，

所述流路的宽度为5～200um；

所述流路的厚度为5～200um。

5.根据权利要求4所述的一种肿瘤细胞的细胞核分选装置，其特征在于，

所述流路的宽度为50～100um；

所述流路的厚度为50～100um。

6.根据权利要求1所述的一种肿瘤细胞的细胞核分选装置，其特征在于，还包括进样机构，所述进样机构包括加样腔和压力往复泵，所述加样腔的进样口设有第一阀门，所述加样腔的出样口设有第二阀门，所述出样口与所述分选装置本体的进液口连通，所述加样腔与所述压力往复泵通过通道连通，所述通道上设有第三阀门。

7.根据权利要求6所述的一种肿瘤细胞的细胞核分选装置，其特征在于，所述通道的内径为5～200um。

8.一种肿瘤细胞的细胞核分选方法，其特征在于，包括：

使细胞核重悬液从分选装置本体的进液口进入不同的微单元；

通过微单元对细胞核重悬液中的肿瘤细胞进行分选，使正常细胞的细胞核顺利流过捕获通道，肿瘤细胞的细胞核滞留在捕获通道内，未经过分选的液体通过流路进入下一个微单元继续进行分选，分选完成后的液体从分选装置本体的出液口排出。

9.根据权利要求8所述的一种肿瘤细胞的细胞核分选方法，其特征在于，所述使细胞核重悬液从分选装置本体的进液口进入不同的微单元具体包括：

对细胞膜进行裂解和离心后，收集细胞核，并使用缓冲液重悬细胞核；

打开进样机构的第一阀门，将细胞核重悬液注入加样腔；

关闭进样机构的第一阀门，打开第二阀门、第三阀门和压力往复泵，对加样腔增压，通过压力使细胞核重悬液从加样腔的出样口排出并从分选装置本体的进液口进入不同的微单元。

10.一种肿瘤细胞的细胞核检测方法，其特征在于，包括：

使细胞核重悬液从分选装置本体的进液口进入不同的微单元；

通过微单元对细胞核重悬液中的肿瘤细胞进行分选，使正常细胞的细胞核顺利流过捕获通道，肿瘤细胞的细胞核滞留在捕获通道内，未经过分选的液体通过流路进入下一个微单元继续进行分选，分选完成后的液体从所述分选装置本体的出液口排出；

关闭进样机构的第二阀门和第三阀门，打开进样机构的第一阀门，将PBS注入进样机构的加样腔；

关闭所述第一阀门，打开所述第二阀门、所述第三阀门和进样机构的压力往复泵，对所述加样腔增压，将PBS通过压力排出所述加样腔的出样口并进入所述分选装置本体内，以对所述分选装置本体进行清洗；

关闭所述第二阀门和所述第三阀门，打开所述第一阀门，将细胞核裂解液注入所述加样腔；

关闭所述第一阀门，打开所述第二阀门、所述第三阀门和所述压力往复泵，对所述加样腔增压，将细胞核裂解液通过压力排出所述加样腔的出样口并进入所述分选装置本体，静置孵育；

孵育结束后，通过所述压力往复泵对所述分选装置本体内液体进行反复抽吸，以对细胞核进行充分裂解；

对所述加样腔增压，在所述分选装置本体的出液口收集细胞核裂解液；

在细胞核裂解液内加入端粒酶逆转录酶抗体包被的磁珠，室温孵育；

孵育结束后，进行磁吸附，去除上清液，使用缓冲液反复清洗磁珠；

磁珠重悬，加入化学发光试剂标记的端粒酶逆转录酶抗体，室温孵育；

孵育结束后，进行磁吸附，去除上清液，使用缓冲液反复清洗磁珠；

磁珠使用预激发液重悬，之后加入激发液震荡混匀后，放在化学发光仪上检测并读取数据。