[发明专利]一种稻曲病菌人工接种方法

说明书

本发明公开了一种稻曲病菌人工接种方法，包含以下步骤：1)采集发病稻田稻曲球，分离纯化并通过液体培养得到菌丝+分生孢子混合液作为接种体备用；2)将水稻按常规播种时间往后推迟15天播种，移栽至水泥槽中；3)接种时间选择破口前3‑5天的傍晚进行，用手持喷雾器将接种混体进行喷雾接种，保证喷雾均匀，连续喷2天；4)接种后的植株用黑布遮阴2天，接种当晚不进行喷水保湿，次日开始定时喷雾保湿，2天后取下黑布正常光照，继续保持90％相对湿度直至破口后3天。本发明通过调节水稻播种时间，稳定诱发稻曲病，使发病率达80％以上；成本低、工作量较小、操作简便、结果可靠，对水稻发育影响小，适合批量的水稻品种稻曲病抗性鉴定。

技术领域

本发明涉及生物技术和农业种植领域，具体为一种稻曲病菌人工接种方法。

背景技术

水稻稻曲病是由稻曲病菌引起的一种穗部真菌病害，近些年随着我国，不仅对水稻产量造成损失，而且可产生真菌毒素，威胁人畜健康，由于近些年耕作制度的变化和杂交水稻推广面积的不断增加，稻曲病逐渐上升为主要病害。2019年，嘉兴发病最重的田块病穗率接近60％，产量损失约30％，选育抗病品种是目前最有效的解决方法，然而由于稻曲病只在穗部发病，且发病条件相对苛刻。

目前室内人工注射接种可以较好的控制发病条件(申请号201110028735.1)，但设备成本高且耗时耗力，不适合大批量种质抗病筛选。另有专利公开了一种通过田间撒施菌土(申请号201910776427.3)或稻曲球厚垣孢子喷雾(申请号201510836639.8)等进行稻曲病抗病测定的方法，该方法虽然可进行大批量抗性测定，但是发病率普遍较低，而且不同品种破口期不同，田间气候多变，发病率和抗性不一定完全相关。因此建立一套接种便利、结果高效稳定的稻曲病接种方法仍是现金稻曲病研究的重要任务。

发明内容

针对上述存在的技术不足，本发明的目的是提供一种稻曲病菌人工接种方法，进行批量的水稻材料的稻曲病抗性测定，解决了目前室内人工注射接种成本高、费时费力的问题，同时避免了大田接种发病率过低的问题。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种稻曲病菌人工接种方法，包含以下步骤：

1)采集发病稻田稻曲球，分离纯化，并通过液体培养得到菌丝+分生孢子混合液，作为接种体备用；

2)将水稻按常规播种时间往后推迟15天播种，苗期进行常规水肥管理，移栽至水泥槽中，移栽前施三元复合肥20kg/667㎡、尿素10kg/667㎡，分蘖初期施肥磷肥15kg/667㎡、尿素10kg/667㎡，孕穗初期施肥钾肥5kg/667㎡、尿素10kg/667㎡；

3)接种时间选择破口前3-5天的傍晚进行，用1L的手持喷雾器将接种混体进行喷雾接种，保证喷雾均匀，连续喷2天；

4)接种后的植株用黑布遮阴2天，接种当晚不进行喷水保湿，次日开始定时喷雾保湿，保持相对湿度在95％以上，2天后取下黑布正常光照，继续保持90％相对湿度直至破口后3天，保持温度在24-32℃，温度过高时用遮阳网进行遮阳；

5)水稻黄熟期，稻曲病发病稳定，割下所有稻穗，统计接种穗发病率和病穗平均病粒数，调查发病情况。