[发明专利]一种钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统，其特征在于：利用钙掺杂碳酸锰微球负载李斯特菌溶血素O获得；其中，所述的钙掺杂碳酸锰微球通过如下方法制备得到：

(1)将CaCl₂水溶液和MnCl₂水溶液搅拌混合均匀，得到CaCl₂和MnCl₂的混合液；然后加入聚苯乙烯磺酸钠，得到含PSS的CaCl₂和MnCl₂的混合液；

(2)将聚苯乙烯磺酸钠加入到Na₂CO₃水溶液中，混合均匀，然后逐滴加入到步骤(1)中得到的含PSS的CaCl₂和MnCl₂的混合液中搅拌反应，离心、洗涤、冷冻干燥，得到钙掺杂碳酸锰微球。

2.根据权利要求1所述的钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统，其特征在于：

所述的钙掺杂碳酸锰微球与李斯特菌溶血素O的质量比为250～500:1。

3.根据权利要求2所述的钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统，其特征在于：

所述的钙掺杂碳酸锰微球与李斯特菌溶血素O的质量比为500:1。

4.根据权利要求1所述的钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统，其特征在于：

步骤(1)中所述的CaCl₂和MnCl₂的混合液中Ca²⁺和Mn²⁺的摩尔比为1:1；

步骤(2)中所述的反应体系中CaCl₂、MnCl₂和Na₂CO₃的摩尔比为5:5:4。

5.根据权利要求1所述的钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统，其特征在于：

步骤(1)中所述的CaCl₂水溶液的浓度为0.6mol/L；

步骤(1)中所述的MnCl₂水溶液的浓度为0.6mol/L；

步骤(1)中所述的聚苯乙烯磺酸钠的添加量为按每毫升CaCl₂和MnCl₂的混合液配比0.2mg聚苯乙烯磺酸钠计算；

步骤(2)中所述的聚苯乙烯磺酸钠的添加量为按每毫升Na₂CO₃溶液配比0.5mg聚苯乙烯磺酸钠计算；

步骤(2)中所述的Na₂CO₃水溶液的浓度为0.6mol/L；

步骤(2)中所述的含PSS的CaCl₂和MnCl₂的混合液与Na₂CO₃水溶液的体积比为5:2；

步骤(2)中所述的搅拌反应的条件为：600rpm搅拌30min；

步骤(2)中所述的离心的条件为：4000rpm离心5min；

步骤(2)中所述的洗涤为用无水乙醇和去离子水交替洗涤。

6.权利要求1～5任一项所述的钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统在制备疫苗免疫佐剂中的应用。

7.权利要求1～5任一项所述的钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统作为疫苗免疫佐剂在制备疫苗制剂中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述的疫苗制剂包括钙掺杂碳酸锰多模式疫苗递送系统和抗原；

所述的抗原为卵清蛋白；

所述的钙掺杂碳酸锰微球与抗原的质量比为50～100:3。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：将抗原和李斯特菌溶血素O加入到溶剂中，再加入钙掺杂碳酸锰微球，室温搅拌孵育24h以上，得到所述的疫苗制剂；

所述的钙掺杂碳酸锰微球与李斯特菌溶血素O的质量比为250～500:1；

所述的溶剂生理盐水。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述的疫苗制剂的免疫接种途径为皮下注射。