[发明专利]一种鱼皮脱细胞真皮基质支架及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及生物医用材料领域，具体涉及一种鱼皮脱细胞真皮基质支架及其制备方法和应用。该方法包括：对鱼皮进行预处理后得到真皮层皮片；对真皮层皮片分别进行病毒灭活、脱色、脱脂、去除免疫原性、交联、冻干定型、切口和灭菌。本发明的方法最大程度地减少了对鱼皮真皮基质支架胶原结构的破坏，胶原纤维排列整齐、孔隙均匀规则、亲水性强、可快速血管化、具有良好的力学性能、良好的生物相容性与组织诱导能力。该材料广泛用于真皮缺损的替代和修复治疗。

技术领域

本发明涉及生物医用材料领域，具体涉及一种鱼皮脱细胞真皮基质支架及其制备方法和应用，该鱼皮脱细胞真皮基质支架材料可用于动物(着重于人体)真皮缺损组织的替代和修复治疗。

背景技术

皮肤是人体中最大的器官，具有极其重要的屏障作用：一方面防止体内水分、电解质、其他物质丢失；另一方面阻止外界有害物质的侵入。当皮肤浅层或是皮肤小面积受损，机体自体新皮肤会得以再生。但如果是大面积的深层皮肤受到创伤，皮肤就不能实现自行修复，此时通常须进行自体皮肤移植。当前，作为一种用于全层皮肤缺损创面的真皮替代物，脱细胞真皮基质(Acellular Dermal Matrix，ADM)与自体表皮植皮的复合方法，是需要植皮的全层皮肤缺损修复的很有前途的方法。

ADM是将天然皮肤经一系列物理、化学方法将动物皮肤中的表皮层和细胞等抗原成分去除，保留真皮基质成分而获得的。ADM除了可用于烧、创伤创面修复外，还可用于粘膜的修补及软组织充填。自体皮和异体皮的来源极为有限，异种(如猪、牛皮等)脱细胞真皮基质就成为了当今组织修复研究的热点，但鱼类皮肤组织作为制备脱细胞真皮基质的研究与开发还不多见。而真皮组织在修复过程中很容易出现一系列的免疫排斥反应。脱细胞真皮支架的制备方法有很多种，目的是能够去除真皮内所有不需要的细胞成分而最大限度保留真皮内胶原网状结构等的完整性。

现有的专利公开了各种脱细胞真皮基质的制备方法，例如公开号为CN201350162Y的专利申请公开了一种脱细胞异体真皮基质组织补片，但并未对该脱细胞真皮基质制备方法进行详述；公开号为CN1775189的专利申请采用哺乳动物皮肤用氢氧化钠溶液和去污剂反复处理，去除组织中细胞遗传物质DNA，再用去污剂去除细胞膜中的脂类物质，但是不能有效去除细胞碎屑成分；公开号为CN102781485A的专利申请公开了一种用于创伤护理和/或其它组织愈合应用的支架材料及其制备方法，但该方法并未设置病毒灭活工艺，对免疫原性物质-脂肪未去除，使用多种化学试剂易导致化学物质残留，从而引起免疫反应，并且该方法制备操作过程复杂，所需时间长；公开号为CN111084900A的专利申请公开了一种新型的脱细胞鱼皮基质的制备方法，但其只是作为一种创面敷料使用，并不是作为复合治疗中的真皮支架使用。

在制备ADM过程中，病毒灭活工艺和脱细胞工艺是主要工艺和技术难点，要求组织中完全去除或灭活病毒、无细胞碎片和DNA成分，同时完整保留天然脱细胞支架的三维结构。目前大多数制备ADM的方法不能完全去除DNA成分，并且制备工序繁琐，耗时长，且大多ADM亲水性差，影响细胞浸润；过于致密，导致血管化速度缓慢；贴敷性不强，导致皮片不易成活、造成自皮移植失败；降解过快，后期创面收缩等。

我国虽鲜见鱼皮脱细胞真皮基质的相关研究，但对鱼胶原蛋白的生物相容性研究显示，鱼胶原蛋白抗原性较低，且不会引起明显的过敏反应。且鱼皮脱细胞真皮基质人畜共患病毒传播风险远低于猪、牛皮，临床的安全性更高。另外，我国是渔业大国，随着水产养殖规模的扩大和相关加工业的发展，许多水产品的废弃物如果合理开发，可以形成高附加值的医疗用品，这也同时保护了环境。

因此，本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种低免疫原性的、亲水性良好的、能快速血管化从而提高植皮成活率，且降解周期与真皮再生速度相适宜的新型脱细胞真皮基质支架材料及其制备方法。

发明内容