[发明专利]一种用于血清抗体检测的猪丹毒丝菌GAPDH分子抗原多肽及其制备方法和应用

说明书

本发明属于生物医学技术领域，提供了一种用于血清抗体检测的猪丹毒丝菌GAPDH分子抗原多肽，所述GAPDH分子抗原多肽包含至少一个猪丹毒丝菌GAPDH表位ERepitope1或ERepitope2，其中GAPDH表位ERepitope1对应ERG‑1多肽，其氨基酸序列为QLVSTDIIGMSY；ERepitope2对应的合成多肽为ERG‑2，其氨基酸序列为：ERG‑2A：HAYTNDQNTLDGPHAKGDLRRGRAA；或者ERG‑2B：DQNTLDGPHAKGDLRRGRAAAQSII；或者ERG‑2C：DGPHAKGDLRRGRAAAQSIIPNSTG；或者ERG‑2D：KGDLRRGRAAAQSIIPNSTGA。上述猪丹毒丝菌的GAPDH分子抗原多肽与猪场常见细菌康复血清均不发生反应，具有高度的特异性，可以用于建立评估猪丹毒丝菌GAPDH免疫后血清抗体水平的检测方法。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种用于血清抗体检测的猪丹毒丝菌GAPDH分子抗原多肽及其制备方法和应用。

背景技术

猪丹毒丝菌（Erysipelothrix rhusiopathiae，又称红斑丹毒丝菌、猪丹毒杆菌）是造成猪丹毒的病原。猪丹毒是世界范围内危害养猪业的主要细菌性疫病之一，在我国猪丹毒和猪肺疫、猪瘟曾并称为猪场三大疫病，目前仍然被我国政府列为二类动物疫病。近年来猪丹毒的危害虽然有所降低，但其临床分离或检出率依然位居前列，依然是猪场主要细菌性疫病。猪丹毒同样可以造成人类感染发病（类丹毒），是一种人兽共患病病原菌。

猪丹毒丝菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）分子是优良的保护性抗原，已经被用于亚单位疫苗的研制。评估疫苗免疫效果就需要建立特异性的血清抗体检测方法。由于GAPDH是一种糖酵解酶，在其他细菌中也有存在结构相似的分子，未进行免疫的猪的血清中也容易出现能够与猪丹毒丝菌GAPDH分子发生交叉反应的抗体，因而难以建立起一种高度特异性的血清检测方法以检测猪丹毒丝菌GAPDH抗原的免疫效果。因而寻找猪丹毒丝菌GAPDH特异性序列进而建立起高度特异性的血清抗体检测方法就成为有效利用猪丹毒丝菌GAPDH抗原的必然要求。

本发明的目的是通过鉴定猪丹毒丝菌GAPDH分子的抗原表位，从而获得一种建立GAPDH抗原免疫后血清抗体水平的特异性检测方法所需的抗原氨基酸序列。

发明内容

本发明所解决的技术问题是：通过鉴定猪丹毒丝菌GAPDH的表位获得一种高度特异性氨基酸序列，从而建立能够特异性检测猪丹毒丝菌GAPDH抗原免疫后血清抗体水平的检测方法。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：提供了一种用于血清抗体检测的猪丹毒丝菌GAPDH分子抗原多肽序列，由该序列构成多肽具有高度特异特异性的特征，仅能与猪丹毒丝菌GAPDH高免血清或猪丹毒丝菌高免血清抗体反应，而不能与其他养殖场常见细菌高免血清发生反应。

优选的，所述GAPDH分子抗原多肽包含至少一个猪丹毒丝菌GAPDH表位ERepitope1或ERepitope2，其中GAPDH表位ERepitope1对应ERG-1多肽，其氨基酸序列为QLVSTDIIGMSY；ERepitope2对应的合成多肽为ERG-2，其氨基酸序列为：ERG-2A：HAYTNDQNTLDGPHAKGDLRRGRAA；或者ERG-2B：DQNTLDGPHAKGDLRRGRAAAQSII；或者ERG-2C：DGPHAKGDLRRGRAAAQSIIPNSTG；或者ERG-2D：

KGDLRRGRAAAQSIIPNSTGA。

上述血清抗体检测猪丹毒丝菌的GAPDH分子抗原多肽可在特异性检测猪丹毒丝菌方面得到应用。

上述血清抗体检测猪丹毒丝菌的GAPDH分子抗原多肽可在评估GAPDH抗原免疫效果方面进行应用。