[发明专利]一种基于杂交链反应检测鼻咽癌抗放疗生物标志物的方法

权利要求书

1.一种检测miR-205的生物传感器，其特征在于，包括miR-205、发夹核酸探针HCR1、发夹核酸探针HCR2、氧化石墨烯和buffer；

miR-205的核苷酸序列为UCCUUCAUUCCACCGGAGUCUG；

发夹核酸探针HCR1和HCR2的核苷酸序列的5’端均连接有荧光素；

HCR1的核苷酸序列为ATTCCACCGGAGTCTGCAAAGTCAGACTCCGGTGGAATGAAGGA；

HCR2的核苷酸序列为ACTTTGCAGACTCCGGTGGAATTCCTTCATTCCACCGGAGTCTG。

2.根据权利要求1所述的一种检测miR-205的生物传感器，其特征在于，所述荧光素标记包括5-羧基荧光素。

3.权利要求1或2所述生物传感器在非疾病诊断上检测miR-205的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测为定性检测或定量检测。

5.利用权利要求1或2所述生物传感器对miR-205进行非疾病诊断目的检测的方法，其特征在于，向含有HCR1和HCR2的溶液中加入氧化石墨烯混合孵育，得到负载发夹核酸探针的氧化石墨烯溶液，与细胞共培养后，激光共聚焦成像。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发夹核酸探针溶液的浓度为90~120×10^-9 mol/L；所述的氧化石墨烯浓度为180~200 µg/mL；所述孵育的时间至少5 min；负载发夹核酸探针的氧化石墨烯溶液与细胞共培养的时间为4~8 h。

7.利用权利要求1或2所述生物传感器对miR-205进行非疾病诊断目的检测的方法，其特征在于，向含有HCR1和HCR2的溶液中加入待检测溶液混合孵育，再加入氧化石墨烯反应，利用荧光分光光度计检测荧光强度。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述发夹核酸探针溶液的浓度为90~120×10^-9 mol/L；所述的氧化石墨烯浓度为140~160 µg/mL；所述孵育的时间至少1 h，孵育的温度为22~27℃。