[发明专利]基于LAMP技术检测新型冠状病毒的引物探针组合、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.基于LAMP技术检测新型冠状病毒的引物探针组合，其特征在于包括：

N基因引物探针组合和/或E基因引物探针组合，其中，N基因引物探针组合为：

N基因探针第一条寡核苷酸链：序列如SEQ ID NO:1所示，

N基因探针第二条寡核苷酸链：序列如SEQ ID NO:2所示，

正向外引物N-F3：序列如SEQ ID NO:7所示，

反向外引物N-B3：序列如SEQ ID NO:8所示，

正向内引物N-FIP：序列如SEQ ID NO:9所示，

反向内引物N-BIP：序列如SEQ ID NO:10所示，

正向环引物N-LF：序列如SEQ ID NO:11所示，

反向环引物N-LB：序列如SEQ ID NO:12所示；

E基因引物探针组合为：

E基因探针第一条寡核苷酸链：序列如SEQ ID NO:3所示，

E基因探针第二条寡核苷酸链：序列如SEQ ID NO:4所示，

正向外引物E-F3：序列如SEQ ID NO:13所示，

反向外引物E-B3：序列如SEQ ID NO:14所示，

正向内引物E-FIP：序列如SEQ ID NO:15所示，

反向内引物E-BIP：序列如SEQ ID NO:16所示，

正向环引物E-LF：序列如SEQ ID NO:17所示，

反向环引物E-LB：序列如SEQ ID NO:18所示。

2.如权利要求1所述的基于LAMP技术检测新型冠状病毒的引物探针组合，其特征在于还包括内标引物探针组合，为：

内标探针第一条寡核苷酸链：序列如SEQ ID NO:5所示，

内标探针第二条寡核苷酸链：序列如SEQ ID NO:6所示，

正向外引物IC-F3：序列如SEQ ID NO:19所示，

反向外引物IC-B3：序列如SEQ ID NO:20所示，

正向内引物IC-FIP：序列如SEQ ID NO:21所示，

反向内引物IC-BIP：序列如SEQ ID NO:22所示，

正向环引物IC-LF：序列如SEQ ID NO:23所示，

反向环引物IC-LB：序列如SEQ ID NO:24所示。

3.如权利要求1或2所述的基于LAMP技术检测新型冠状病毒的引物探针组合，其特征在于：所述N基因引物探针组合、E基因引物探针组合、内标引物探针组合中的外引物对、内引物对、环引物对的摩尔比为1:(1～8):(1～4)。

4.如权利要求3所述的基于LAMP技术检测新型冠状病毒的引物探针组合，其特征在于：所述正向外引物F3和反向外引物B3的摩尔比为1：1，所述正向内引物FIP和反向内引物BIP的摩尔比为1：1，所述正向环引物LF和反向环引物LB的摩尔比为1：1。

5.如权利要求1或2所述的基于LAMP技术检测新型冠状病毒的引物探针组合，其特征在于：所述N基因引物探针组合、E基因引物探针组合、内标引物探针组合中的探针第二寡核苷酸链的量与探针第一寡核苷酸链的量的比率不大于1：1。

6.如权利要求1或2所述的基于LAMP技术检测新型冠状病毒的引物探针组合，其特征在于：所述N基因探针第一条寡核苷酸链的3’端标记有BHQ-1，N基因探针第二条寡核苷酸链的5’端标记有FAM；E基因探针第一条寡核苷酸链的3’端标记有BHQ-3，E基因探针第二条寡核苷酸链的5’端标记有CY5；内标探针第一条寡核苷酸链的3’端标记有BHQ-2，内标探针第二条寡核苷酸链的5’端标记有ROX。

7.基于LAMP技术检测新型冠状病毒的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1或2所述的基于LAMP技术检测新型冠状病毒的引物探针组合。

8.如权利要求7所述的基于LAMP技术检测新型冠状病毒的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括缓冲液、链置换DNA聚合酶、逆转录酶、镁离子、脱氧核糖核苷三磷酸(dNTPs)。