[发明专利]一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法

说明书

本发明公开了一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，包括如下步骤：S1：标准品溶液配制；S2：供试品溶液制备：取待测石斛健康无病害的鲜茎段，去除叶片及叶鞘，将茎段清洗干净后剪成小段，烘干后粉碎，过筛，取250mg样品粉末，加入10ml无水乙醇，浸渍20min后超声处理，冷却后用乙醇补足失重，得10ml供试品溶液；S3：建立标准曲线；S4：毛兰素含量测量：所测样品毛兰素含量计算式为：样品毛兰素含量＝(X*供试品溶液体积)/配制供试品溶液所用石斛粉末质量，本发明精密度高，重复性好，回收率高，分析快速，简便易行，成本低廉，能够为石斛药材的品质控制提供相关依据，具有广阔的应用前景，有利于推广应用。

技术领域

本发明涉及植物栽培技术领域，尤其涉及一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法。

背景技术

石斛属(Dendrobium)是兰科第二大属，多年生常绿附生草本植物，全球种类超1500种，在我国分布有74种及2变种，主要分布于秦岭以南诸省，尤以云南南部为多，生长于海拔1400-1600米高山地区的岩石、树皮上。石斛属植物茎是我国传统的药用植物，最早在《神农本草经》中将石斛列为上品，具有生津、止咳、润喉等功效。《中国药典》2015版收录了铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)，金钗石斛(Dendrobium nobileLindl)，鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl)，流苏石斛(Dendrobium fimbriatumHook)的栽培品及其同属植物近似种的新鲜或干燥茎。现代研究表明石斛中主要含有多糖、生物碱、菲类、联苄类、倍半萜类、黄酮类、香豆素、氨基酸、微量元素等化学成分，主要药效体现在具有增强免疫力、抗肿瘤、抗氧化及延缓衰老、降血糖、抗炎等。

毛兰素分子式为C₁₈H₂₂O₅，全称为2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙基]苯酚(2-methoxy-5_[2-(3，4，5-trimethoxyphenyl)ethyl]phenol)。毛兰素具有类似秋水仙碱的结构，又属于考布它丁类药物，它们可以竞争性与微管蛋白结合。现代药理学研究表明：毛兰素具有抑制癌细胞增殖、促使癌细胞凋亡、阻滞癌细胞的细胞周期等药理作用，能从多方面、多机制起到抗肿瘤功效。

目前，HPLC(高效液相色谱法)法广泛应用于药品分析和食品质量检测中。对于采用HPLC法检测石斛中的毛兰素，药典中的检测方法为：将石斛粉碎后过三号筛，使用甲醇为溶剂，超声提取，采用C18色谱柱，使用乙腈-0.05％磷酸水溶液(37：63)为流动相，甲醇为溶剂，检测波长为230nm，分别吸取对照品和供试品溶液一定量，注入液相色谱仪测定。但是该方法操作复杂，检测效率低，成本也较高。因此，急需开发一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法以解决上述技术问题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的是提供一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，精密度高，重复性好，回收率高，分析快速，简便易行，成本低廉，能够为石斛药材的品质控制提供相关依据，具有广阔的应用前景，有利于推广应用。

为了实现上述目的，本发明提供的一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，包括如下步骤：

S1：标准品溶液配制

精密称取毛兰素标准品10.13mg放入10ml容量瓶中，加入无水乙醇溶解后定容至刻度，摇匀得到浓度为1.013mg/ml标准品溶液，再将该溶液梯度稀释成六份梯度浓度标准品溶液；

S2：供试品溶液制备

取待测石斛健康无病害的鲜茎段，去除叶片及叶鞘，将茎段清洗干净后剪成小段，烘干后粉碎，过筛，取250mg样品粉末，加入10ml无水乙醇，浸渍20min后超声处理，冷却后用乙醇补足失重，得10ml供试品溶液；

S3：建立标准曲线