[发明专利]一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法

权利要求书

1.一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：标准品溶液配制

精密称取毛兰素标准品10.13mg放入10ml容量瓶中，加入无水乙醇溶解后定容至刻度，摇匀得到浓度为1.013mg/ml标准品溶液，再将该溶液梯度稀释成六份梯度浓度标准品溶液；

S2：供试品溶液制备

取待测石斛健康无病害的鲜茎段，去除叶片及叶鞘，将茎段清洗干净后剪成小段，烘干后粉碎，过筛，取250mg样品粉末，加入10ml无水乙醇，浸渍20min后超声处理，冷却后用乙醇补足失重，得10ml供试品溶液；

S3：建立标准曲线

取配制的六份梯度浓度的标准品溶液向高效液相色谱仪中依次进样，以进样标准品毛兰素浓度X(mg/mL)为横坐标，色谱峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为Y＝33462744.98X-5801.6243，R²＝0.99975(n＝6)；

S4：毛兰素含量测量

将所制备的供试品溶液向高效液相色谱仪中依次进样六次，将所得毛兰素特征峰面积平均值Y代入回归方程计算出X，所测样品毛兰素含量计算式为：样品毛兰素含量＝(X*供试品溶液体积)/配制供试品溶液所用石斛粉末质量。

2.根据权利要求1所述的一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，其特征在于，所述S1中，六份梯度浓度标准品溶液的浓度分别为0.126625mg/ml，0.0633125mg/ml，0.03165625mg/ml，0.01582812mg/ml，0.00791406mg/ml和0.00395703mg/ml。

3.根据权利要求1所述的一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，其特征在于，所述S2中，过筛的目数为40目。

4.根据权利要求1所述的一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，其特征在于，所述S2中，超声处理时间为45min，功率为250W，频率为45KHZ。

5.根据权利要求1所述的一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，其特征在于，所述S3和S4中，高效液相色谱仪的检测器为紫外检测器，色谱柱为Shim-pack GIS C18(4.6×250mm，5μm)，流动相为乙腈-三氟乙酸水溶液(pH＝3.25)，流速1.5ml/min(水相0.9ml/min，有机相0.6ml/min)，检测波长232nm，进样量20μl，柱温25℃，流动相进入高效液相色谱仪前过0.45μm有机滤膜。

6.根据权利要求1所述的一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，其特征在于，所述S3中，标准品溶液在注入高效液相色谱仪前需过0.45μm滤膜。

7.根据权利要求1所述的一种测定石斛属植物中毛兰素含量的新方法，其特征在于，所述S4中，供试品溶液在注入高效液相色谱仪前需过0.45μm滤膜。