[发明专利]一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法

说明书

本发明公开了一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，为采用高效液相色谱仪检测样本中乙二胺四乙酸二钠含量；包括以下步骤：（1）样品预处理：将需要检测的甲硝唑凝胶与磷酸水溶液混合，过滤，收集滤液，作为供试品溶液；（2）洗脱：将供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，利用紫外检测器，泵入洗脱液采用梯度洗脱程序进行洗脱；（3）检测：记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的含量。本发明的检测方法专属性好，灵敏度高，线性范围、准确度均能满足测定要求，且耐用性良好。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，特别涉及一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法。

背景技术

甲硝唑凝胶是一种临床中常用的外用药物，外形为淡黄色的透明凝胶，当中含有的有效成分甲硝唑可以杀灭很多厌氧菌及螨虫，因此是治疗面部酒糟鼻、丘疹性痤疮以及脓包等皮肤病的常用药物。

甲硝唑，英文名称为Metronidazole，化学名为2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇，分子式为C₆H₉N₃O₃，分子量为171.16，CAS号为443-48-1，化学结构式如下：

目前国内批准的甲硝唑凝胶一共有5家，规格为0.75%。原研尚未进口到国内。同时《中国药典》中也没有有关物质及组分检查项，缺少全面控制甲硝唑凝胶质量的关键一环。

因此，目前急需一种分析过程简单且能有效控制甲硝唑凝胶质量的分析方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，解决上述现有技术问题中的一个或者多个。

本发明提供的一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，为采用高效液相色谱仪检测样本中乙二胺四乙酸二钠含量。

在某些实施方案中，一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法，包括以下步骤：

（1）样品预处理：将需要检测的甲硝唑凝胶与磷酸水溶液混合，过滤，收集滤液，作为供试品溶液；

（2）洗脱：将供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，利用紫外检测器，泵入洗脱液采用梯度洗脱程序进行洗脱；

（3）检测：记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的含量。

在某些实施方案中，步骤（3）具体为：利用高效液相色谱仪分别测定各不同浓度的标准对照品溶液和供试品溶液，分别记录标准对照品溶液的浓度和对应的峰面积和供试品的峰面积，对照品储备液溶液的各质量浓度及色谱图峰面积进行线性回归分析，得回归方程和相关系数，做出标准曲线；

利用外标法从供试品溶液的峰面积求得其对应的甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的含量。

在某些实施方案中，高效液相色谱仪测定时采用梯度洗脱。

在某些实施方案中，以磷酸盐缓冲液为流动相A：浓度为0.049mol/L~0.051mol/L，优选为0.05mol/L，pH值为1.5；流动相B为乙腈；

其中：所述磷酸缓冲液的制备步骤为：取二水合磷酸二氢钠7.8g，加水1000mL，用磷酸调节pH至1.5。

在某些实施方案中，梯度洗脱程序如下表所列：

。

在某些实施方案中，对照品溶液的制备方法为：

取乙二胺四乙酸二钠对照品20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液使溶解并稀释定容至刻度，摇匀，精密移取该溶液2ml置20ml量瓶中，加入0.1%磷酸水溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，平行配制两份。

在某些实施方案中，供试品溶液的制备方法为：