[发明专利]一种硫代葡萄糖苷类化合物的检测方法

权利要求书

1.一种硫代葡萄糖苷类化合物的检测方法，包括以下步骤：

待测样品和提取剂混合，依次进行提取和固液分离，得到上清液作为待测溶液；

利用第一超高液相色谱与质谱分析对所述待测溶液进行定性分析；

利用第二超高液相色谱与质谱分析对所述待测溶液进行定量分析，得到所述待测样品中硫代葡萄糖苷类化合物的色谱峰面积；

将所述待测样品中硫代葡萄糖苷类化合物的色谱峰面积代入硫代葡萄糖苷类化合物标准品的浓度-色谱峰面积标准曲线中，得到待测样品中硫代葡萄糖苷类化合物的含量；

所述第一超高液相色谱与质谱分析的参数包括第一超高液相色谱参数和第一质谱参数：

所述第一超高液相色谱参数包括：

色谱柱为Merck ZIC-HILIC柱，100 mm×2.1 mm，3.5 μm 100Å；

色谱柱温度为40℃；

流动相A相为乙腈，流动相B相为5mmol/L乙酸铵水溶液；流速为0.3 mL/min；进样体积为3 μL；

洗脱方式为梯度洗脱；

所述梯度洗脱为：

0~1 min，90%A；

1~9 min，90%~65%A；

所述第一质谱参数包括：

扫描模式为母离子扫描，负离子模式；

电喷雾电压为-4.5 kV，离子源温度为450℃，子离子为96.0 Da，母离子扫描范围为300.0~800.0 Da，扫描速率为200 Da/s，气帘气40.00 psi，喷雾气45 psi，辅助加热气45psi；

所述第二超高液相色谱与质谱分析的参数包括第二超高液相色谱参数和第二质谱参数：

所述第二超高液相色谱参数包括：

色谱柱为Merck ZIC-HILIC柱，100 mm×2.1 mm，3.5 μm 100Å；

色谱柱温度为40℃；

流动相A相为乙腈，流动相B相为5 mmol/L乙酸铵水溶液；流速为0.3 mL/min；进样体积为3 μL；

洗脱方式为梯度洗脱；

所述梯度洗脱包括：

0~1 min，90%A；

1~9 min，90%~65%A；

所述第二质谱参数包括：

扫描模式：MRM；

电喷雾电压为-4.5 kV，离子源温度为450℃，扫描速率为200 Da/s，气帘气40.00 psi，喷雾气45 psi，辅助加热气45 psi；

所述硫代葡萄糖苷类化合物标准品包括3-丁烯基硫苷标准品、4-羟基苄基硫苷标准品或黑芥子硫苷标准品；

基于m/z为96.0的碎片构建一套母离子模式扫描定性方法；

基于m/z为96.0的碎片为定量离子，利用硫代葡萄糖苷类化合物标准品，构建一套多反应监测模式扫描定量方法。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品的粒径为250~830 μm。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品通过以下步骤制备得到：

将待测原料依次进行冷冻干燥和粉碎，得到所述待测样品。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述待测原料包括花椰菜或绿花菜叶。

5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述冷冻干燥的温度为-40~-60℃，时间为12~48 h。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述提取剂为体积浓度为60~90%的甲醇水溶液。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品和提取剂的用量比为（0.1~0.5）g：（5~50）mL。

8.根据权利要求1或7所述的检测方法，其特征在于，所述提取包括依次进行浸提和超声辅助提取；所述浸提的温度为60~90℃，时间为20~60 min。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述超声辅助提取的温度为30~60℃，频率为30~50 kHz，时间为10 min。