[发明专利]一种18

说明书

本发明公开了一种¹⁸F标记纳米抗体探针及其制备方法和应用，涉及核医学和分子影像领域，该探针的靶向载体包括纳米抗体MM01、纳米抗体MM02或纳米抗体MM02的衍生物，其制备方法为：合成小分子化合物前体RJDJ01；制备¹⁸F标记前体¹⁸F[F]‑RJDJ01；通过点击化学反应制备氟‑18(¹⁸F)标记纳米抗体探针；该探针为用于检测多发性骨髓瘤CD38特异性纳米抗体。本发明通过创制CD38特异性新型纳米抗体探针¹⁸F[F]‑MM01，实现了对CD38表达的无创可视化，无创检测多发性骨髓瘤。该探针具有制备工艺简单、成本低廉、特异性高、稳定性高、显像周期短、辐射剂量低、易于临床转化等优点。

技术领域

本发明涉及核医学和分子影像领域，尤其涉及一种¹⁸F标记纳米抗体探针及其制备方法和应用。

背景技术

1993年比利时科学家Hamers等人在《Nature》杂志中首次报道在羊驼外周血液中存在一种天然缺失轻链的抗体(Nature.1993；363(6428):446-8.)，这种具有特殊结构域的抗体即为重链抗体(Heavy-chain antibodies,HCAbs)。通过分子生物学手段，克隆重链抗体的可变区即可得到只有重链可变区的抗原结合片段，即为纳米抗体(VHH， VariableDomain of Heavy Chain of Heavy Chain Antibody)。VHH晶体宽为2.5nm，长 4nm，分子量只有15KDa，因此也被称为纳米抗体(Ablynx公司注册商品名)。纳米抗体是目前已知的可结合目标抗原的最小抗体单位，具有亲和力高、分子量小、制备成本低廉(既可以运用大肠杆菌表达，也可以运用酵母、中国仓鼠卵巢细胞等真核表达体系表达)、易于临床转化和推广应用的优点。

纳米抗体是近年来构筑分子影像探针的热门靶向载体(Theranostics. 2014；4(4):386-98.)。目前，多种短半衰期核素已用于标记纳米抗体，制备纳米抗体分子影像探针。锝-99m(99mTc；T1/2＝6.02h)标记靶向程序性死亡配体1(PD-L1) 的纳米抗体探针已成功转化至临床，用于非小细胞肺癌患者的无创诊断(J Nucl Med. 2019；60(9):1213-1220.)；镓-68(68Ga；T1/2＝1.1h)标记靶向人类表皮生长因子受体 (HER2)的纳米抗体探针也已成功转化至临床，用于乳腺癌的无创诊断(J Nucl Med. 2016；57(1):27-33.)。以上实例说明放射性核素标记纳米抗体探针极具临床转化应用前景，可用于人类恶性肿瘤的早期无创诊断、关键致病靶点的可视化、单克隆抗体(mAb) 治疗患者的筛选以及单克隆抗体治疗后疗效评价。但是，99mTc属于单光子发射放射性核素，所标记纳米抗体探针的显像性能欠佳；68Ga一般需要通过锗镓发生器或配置有固体靶的医用回旋加速器制备，制备价格昂贵，且半衰期较短，所标记纳米抗体探针不适宜运输及推广应用。氟-18(¹⁸F；T1/2＝109.8min h)是临床正电子发射断层显像(PET)最长使用的放射性核素，其正电子发射率高达97％，正电子射程为0.5mm，不发射伽马射线，是创制PET显像探针的最佳核素之一。但是，因为放射化学产率 (RCY)较低、标记条件苛刻(需要高温、有机溶剂)等原因的限制，¹⁸F并没有广泛用于纳米抗体的核素标记(Chem Rev.2020；120(8):3787-3851.)。

多发性骨髓瘤(MM)是一种B细胞来源的血液系统恶性肿瘤，目前临床尚无有效的诊疗措施。CD38是多发性骨髓瘤特异性的生物标志物。靶向CD38的单克隆抗体达雷妥尤单克隆抗体注射液(daratumumab)在欧美和我国均已获批临床，用于新发或复发难治性多发性骨髓瘤的治疗。诸多因素介导达雷妥尤单抗的治疗疗效，其中最主要的因素是CD38蛋白表达水平。目前，临床判断多发性骨髓瘤细胞CD38表达水平严重依赖于骨髓穿刺物的流式细胞学检测。但是，该方法创伤性较大、且可重复性较差。因此，临床亟需一种可用于无创可视化CD38表达水平、早期精准诊断多发性骨髓瘤的分子影像学方法。