[发明专利]一种黄酮类化合物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种黄酮类化合物及其制备方法和用途，其中黄酮类化合物包括黄酮类化合物FLM_1‑24、黄酮衍生物FLM_25‑40和异黄酮衍生物FLM_41‑48。本发明黄酮类化合物可用于制备对人肝癌细胞系Huh7细胞的Nogo‑B表达具有调节作用的调节剂，具体地说，本发明黄酮类化合物对人肝癌细胞系Huh7细胞的Nogo‑B表达具有良好的抑制活性。

技术领域

本发明涉及一种黄酮类化合物及其制备方法和用途。本发明中涉及的黄酮类化合物对人肝癌细胞系Huh7细胞的Nogo-B表达具有良好的抑制活性。

背景技术

黄酮类化合物(flavonoids)是指两个苯环通过三个碳原子相互连接而成的一系列化合物的总称，即具有C₆-C₃-C₆结构的一类化合物的总称。其广泛存在于自然界的植物中，属植物次生代谢产物，在植物体内大部分与糖结合成苷类或碳糖基的形式存在，也有的以游离形式存在。其结构类型可分为：黄酮类、异黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、双黄酮类等。

研究表明，黄酮类化合物、衍生物及其类似物具有多种生物功能。黄酮类化合物有提高动物机体抗氧化及清除自由基的能力，在防治心血管疾病，如防止动脉硬化、降低血脂和胆固醇、降低血糖、舒张血管和改善血管通透性及减少冠心病发病率等方面均具有良好的效果。同时，几乎所有类黄酮对很多微生物都具有程度不等的抑菌活性。黄酮类化合物还能够诱发癌细胞和肿瘤细胞的凋亡，发挥抗癌抗肿瘤作用，而对正常组织细胞的凋亡起延缓作用。黄酮类化合物可提高机体免疫机能，促进机体健康。

Nogo-B是网状蛋白Nogo超家族成员之一。Nogo家族除Nogo-B之外，还有Nogo-A、Nogo-C等成员。这些成员在体内组织中的分布上存在明显的特异性：Nogo-A在中枢神经系统中高表达，Nogo-C在骨骼肌中高表达，而Nogo-B则在大部分组织中均有表达，如肝脏，血管，心脏，肾脏，神经系统等组织中均能检测到Nogo-B的存在。功能上发现Nogo-B是一种内质网(endoplasmic reticulum，ER)驻留蛋白，调节ER的结构和功能。Nogo-B在肝脏中与多种病理过程相关，参与肝细胞增殖和肝再生、酒精性肝病、肝纤维化及其终末期肝硬化等。2020年，有研究发现Nogo-B表达的缺失能明显减缓胆汁淤积性肝病的症状；Nogo-B通过调控碳水化合物作用元件结合蛋白(ChREBP)和胰岛素通路参与肝脏糖脂代谢过程，减少Nogo-B表达可降低高葡萄糖或高果糖食物诱导的炎症、细胞凋亡、内质网应激现象的出现并激活能量代谢过程，从而有效拮抗由高葡萄糖或果糖食物诱发的代谢紊乱，因此Nogo-B可能是一个潜在的治疗糖脂代谢紊乱的重要靶点，能够作为药物设计和筛选的靶基因。

双荧光素酶报告基因报告系统具有灵敏度高、动态范围广、应用灵活等优势，广泛应用于基因调控、非编码RNA靶向互作等研究领域。通常将目的基因转录调控原件构建入带有荧光素酶(Firefly luciferase)的表达载体，构建成报告基因质粒，使这段序列调控Firefly luciferase的转录表达。然后将报告基因质粒转染细胞，给予其不同的处理后裂解细胞，并加入底物荧光素(luciferin)，Firefly luciferase可催化luciferin发出荧光(最强波长在560nm左右)。检测得到的荧光值高低可以判断不同处理组对该转录调控原件的影响。为避免由于质粒转染细胞时效率差异所造成的误差，通常会转入Renillaluciferase的报告基因质粒作为内参(最强波长在465nm左右)，通过这种方法，可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性。比如，培养细胞的数目和活力的差别，细胞转染和裂解的效率。通常实验报告基因偶联到调控的启动子，研究调控基因的结构和生理基础，因此经过不同药物处理后通过比较偶联启动子的报告基因的荧光值高低，能够从启动子水平判断药物对相关基因的转录激活作用，从而筛选对目的基因表达促进或抑制的药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种黄酮类化合物及其制备方法和用途。本发明黄酮类化合物对人肝癌细胞系Huh7细胞的Nogo-B表达具有良好的抑制活性。