[发明专利]能有效编辑猪PCBP1基因的sgRNA及其应用

权利要求书

1.一条能有效敲除猪PCBP1基因的sgRNA，其特征在于：所述sgRNA特异性靶向猪PCBP1基因的第485位到504位的序列。

2.如权利要求1所述能有效敲除猪PCBP1基因的sgRNA，其特征在于：其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.一种CRISPR/Cas9基因敲除载体，其特征在于：所述CRISPR/Cas9基因敲除载体为连接有所述特异性靶向猪PCBP1基因的sgRNA的载体。

4.如权利要求3所述敲除载体构建方法，其特征在于：合成所述sgRNA的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其互补链如SEQ ID NO.2所示，再将单链的sgRNA的DNA序列分别经过退火后形成1条靶向猪PCBP1唯一内含子不同位点的sgRNA的寡核苷酸链；然后将该寡聚核苷酸连入PX330质粒载体中。

5.如权利要求1所述能有效敲除猪PCBP1基因的sgRNA或包含所述sgRNA的CRISPR/Cas9基因敲除载体在猪PCBP1基因敲除中的应用。

6.一种制备PCBP1基因敲除细胞系的方法，其特征在于：将含有所述特异性靶向猪PCBP1基因的sgRNA的CRISPR/Cas9基因敲除载体导入细胞，敲除PCBP1基因。

7.一种制备PCBP1基因敲除猪模型的方法，其特征在于：利用所述CRISPR/Cas9基因敲除载体实现猪PCBP1基因的敲除。

8.一种试剂盒，其特征在于：包含所述sgRNA，所述试剂盒的功能为以下一至五中的至少一种：

一、特异性识别猪PCBP1基因；

二、敲除猪PCBP1基因；

三、对猪PCBP1基因进行基因编辑；

四、避免猪感染病毒；

五、培育或制备基因编辑猪。