[发明专利]胶原蛋白肽对胃粘膜损伤的保护作用

说明书

胶原蛋白肽对胃黏膜损伤的保护作用。本发明提供了胶原蛋白肽，其由哺乳动物皮料水解和酶解而得。另外，本发明还提供了该胶原蛋白肽的制备方法及其在制备用于治疗或预防胃粘膜的损伤的药物中的应用。

技术领域

本发明属于蛋白质药物领域，具体而言，本发明涉及胶原蛋白肽，可大规模生产，用于治疗或预防胃粘膜的损伤。

背景技术

胃溃疡是最常见的胃肠道疾病，患病人群约占全球人数的4-5％，过量饮酒是胃溃疡的一个主要病因。我国饮酒人数众多，西北地区饮酒人数比例高达66.2％，中西、南部地区这一比例也高达30.9％-43.4％，个别地区男性饮酒的比例甚至达到了90.0％。

完整的胃黏膜对胃壁起着一定的保护作用，可以抵御酒精损伤，但是当酒精浓度过高时则会损伤胃黏膜。研究发现，酒精浓度与损伤程度具有相关性，有关动物实验发现，当胃内酒精浓度高于14％时即可破坏胃黏膜屏障，引起胃组织损伤。

另外，现有技术有不少酶解制备胶原蛋白(肽)的方法，例如，中国专利申请CN110922475A公开了一种酶解提取猪皮胶原蛋白的方法，包括将猪皮用磷酸盐清洗，采用水冲洗，沥干，冷冻干燥，粉碎，获得猪皮粉末；将猪皮粉末置于氯化钠溶液中浸泡处理10～16h，离心，获得沉淀物；将沉淀物与水混合，加入蛋白酶进行酶解，后续处理，获得猪皮胶原蛋白。但是，本发明人凭借长期的研究经验发现，这些方法非常不适用于大规模生产，难以产业化推广。以中国专利申请CN110922475A为例，离心本身就不适合成吨规模的工艺；而且，通过过滤来收获沉淀物/不溶物，符合工业成本的过滤设备往往使得滤渣与填料/滤膜混合在一起，难以分离；当然，对大量猪皮原料(皮料)直接进行沥干、冷冻干燥等，都也是在上规模后很难实施的。

然而，本发明人没有畏难，反而在没有现有技术启示的情况下，经过长期艰苦研究，令人意外地获得了一种胶原蛋白肽的制备方法，可以大规模生产合格的胶原蛋白肽，生产的胶原蛋白肽质量稳定，尤其是能用于治疗或预防胃粘膜的损伤。

发明内容

本发明提供了新的胶原蛋白肽、其制备方法及其在制备用于治疗或预防胃粘膜的损伤的药物中的应用。

具体而言，在第一方面，本发明提供了胶原蛋白肽，其由依次包括如下步骤的方法制备：

(1)将哺乳动物皮料进行切割；(2)水洗；(3)加酸和浸酸；(4)退酸和中和；(5)水洗；(6)仅用水水解；(7)过滤；(8)超滤膜浓缩；(9)阳离子交换层析；(10)阴离子交换层析；(11)纳滤膜浓缩；(12)酶解；(13)板框压滤；(15)降膜双效浓缩；(16)纸板过滤；(17)杀菌；和(18)任选的干燥。

优选在本发明第一方面的胶原蛋白肽中，哺乳动物是猪或牛，更优选是猪。在本发明的具体实施方式中，哺乳动物皮料是猪皮料。

优选在本发明第一方面的胶原蛋白肽中，加酸包括加酸使pH值为0.5-3.5。例如，加酸使pH值为1.5-2.5。

优选在本发明第一方面的胶原蛋白肽中，中和包括加碱使pH值为4-8。例如，加碱使pH值为5.5-6.5。

水解仅用水水解，不额外加入酸或碱。优选在本发明第一方面的胶原蛋白肽中，水解包括于60-80℃水解6-8小时。更优选水解的温度为65-75℃。也更优选水解的时间为7小时。

优选在本发明第一方面的胶原蛋白肽中，酶解包括使用中性蛋白酶和碱性蛋白酶于45-65℃酶解4-6小时(优选4.5-5.5小时)。更优选酶解的温度为50-60℃。也更优选酶解的时间为4.5-5.5小时。中性蛋白酶的浓度可以是0.1-0.15％(W/W)，例如是0.125％(W/W)；碱性蛋白酶的浓度可以是0.05-0.1％(W/W)，例如是0.075％(W/W)。

在第二方面，本发明提供了本发明第一方面的胶原蛋白肽的制备方法，其依次包括如下步骤：