[发明专利]一种基于玻璃微球的微流控芯片及其应用

权利要求书

1.一种基于玻璃微球的微流控芯片，其特征在于，以玻璃载玻片为基底，以聚二甲基硅氧烷为主体，并在聚二甲基硅氧烷上蚀刻微通道，微通道内含多个面心立方体结构且进行抗体修饰的玻璃微球，微通道两侧分别设置进样孔和出样孔。

2.根据权利要求1所述基于玻璃微球的微流控芯片，其特征在于，玻璃微球直径为540-960nm，进样孔和出样孔直径为0.8-1.2mm。

3.根据权利要求1所述基于玻璃微球的微流控芯片，其特征在于，所述微通道中部宽度为0.3-0.5cm，微通道由中部逐渐变窄过渡至进样孔和出样孔宽度。

4.权利要求1-3任意一项基于玻璃微球的微流控芯片在细胞培养液上清或血清样本、全血样本、尿液样本、脑脊液样本、胸腹水样本任意一项外泌体捕获装置中的应用。

5.权利要求1-3任意一项基于玻璃微球的微流控芯片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）利用光刻技术与等离子刻蚀方法在聚二甲基硅氧烷上蚀刻出进样孔、出样孔和与两者相连的微通道；

（2）二甲基硅氧烷与固化剂混合均匀,除去混合物中气泡，浇注在模具上，加热固化后剥离模具与固化物，得到聚二甲基硅氧烷层；

（3）等离子体处理聚二甲基硅氧烷层，GPTMS无水乙醇溶液对聚二甲基硅氧烷层进行表面硅烷化修饰，将紧密排列成面心立方体结构的玻璃微球周期性排列填充微通道中；将上层聚二甲基硅氧烷和下层玻璃载玻片进行不可逆键合,用打孔针在上层聚二甲基硅氧烷上打进样孔和出样孔得到制备完成的微流控芯片。

6.权利要求5所述基于玻璃微球的微流控芯片的使用方法，其特征在于，步骤如下：

A. 芯片内玻璃微球的PDA预处理：NaOH溶液清洗芯片微通道后注入APTES溶液，孵育后用无水乙醇冲洗微通道，干燥后烘烤，在热板上，将多巴胺溶液注入芯片微通道中，随后用Tris-HCL缓冲液冲洗；

B. 特异性抗体及包被：将抗体修饰后的芯片微通道中，室温下进行抗体固定化，用反应缓冲液冲洗芯片微通道；

C.样本外泌体捕获：将原始溶液注入芯片中进行外泌体捕获，然后用缓冲液洗脱，收集各自洗脱液。

7.根据权利要求5所述基于玻璃微球的微流控芯片的制备方法，其特征在于，步骤（2）中聚二甲基硅氧烷与固化剂质量比为10:1，固化温度为80℃-90℃。