[发明专利]自身免疫性脑炎相关的NMDAR重组蛋白、其编码序列、制法和应用在审
申请号: | 202110735331.X | 申请日: | 2021-06-30 |
公开(公告)号: | CN113373156A | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
发明(设计)人: | 许敏;黄敬双;秦枫;潘敬梅;段继龙;王健;潘进海;张伟;曹长春;赵婷 | 申请(专利权)人: | 四川携光生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/85;C07K14/705;G01N33/68;G01N33/543 |
代理公司: | 成都九鼎天元知识产权代理有限公司 51214 | 代理人: | 刘小彬 |
地址: | 610000 四川省成都市高新*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 自身 免疫性 脑炎 相关 nmdar 重组 蛋白 编码 序列 制法 应用 | ||
1.自身免疫性脑炎相关的NMDAR重组蛋白的编码序列,其特征在于,所述编码序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的编码序列编码的重组蛋白,其特征在于,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种重组蛋白表达载体,其特征在于,所述重组蛋白表达载体含有SEQ ID NO.1所示编码序列的质粒载体。
4.权利要求2所述的重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.将SEQ ID NO.1所示的编码序列连接重组载体,构建重组蛋白表达载体;
S2.将重组蛋白表达载体转化进大肠杆菌的感受态细胞,培养,得到重组蛋白表达菌株;
S3.从重组蛋白表达菌株中提取质粒,将提取得到的重组质粒转染入CHO-S细胞中,进行大规模培养;
S4.收集细胞上清,纯化,得到重组蛋白。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述S2中,还包括验证步骤:将重组蛋白表达载体转化进大肠杆菌的感受态细胞,培养,挑取转化后的单菌落进行PCR验证。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述PCR验证时所用的正向引物为T7promoter primer,反向引物为BGH reverse primer。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述重组载体为真核载体pcDNA3.1(+)。
8.权利要求2所述的重组蛋白在制备抗NMDAR自身抗体检测材料中的应用。
9.一种抗NMDAR自身抗体检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求2所述的重组蛋白。
10.根据权利要求9所述的检测试剂盒,其特征在于,所述重组蛋白与磁微粒偶联。
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