[发明专利]一种角膜损伤修复的生物材料及其制备方法与应用

说明书

本发明提供一种角膜损伤修复的生物材料，所述角膜损伤修复的生物材料为脂肪间充质干细胞来源的脱细胞基质。本发明还提供了该角膜损伤修复的生物材料的制备方法，包括获取脂肪间充质干细胞，传代培养和脱细胞基质的制备。本发明提供的角膜损伤修复的生物材料的生物相容性好，来源广泛，适合于大量生产，而且能够促进角膜上皮细胞生长，促进角膜缺损修复；促进角膜三叉神经轴突再生，恢复角膜知觉；降低炎症反应；降低后期角膜瘢痕形成，治疗修复甚佳，在促进角膜缺损修复方面具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及组织功能及眼科修复技术领域，特别是一种角膜损伤修复的生物材料及其制备方法与应用。

背景技术

角膜是眼睛最外层的透明层，在良好的视力形成过程中发挥重要的作用。眼科医生在临床诊治过程中最常见的眼部疾病包括眼表擦伤和角膜上皮缺陷。受损的角膜如果不及时治疗，发展为持续性角膜上皮缺损后将会导致严重的并发症，如眼部感染、发生基质溃疡、穿孔、瘢痕等，最终影响视力。针对难治性角膜上皮缺损的病例，临床医生通常会采取羊膜移植。羊膜移植已被证明对眼表疾病的治疗有显著疗效，其含多种生长因子和抑制炎症的蛋白等。但羊膜可能携带来自供者的病毒等，存在潜在的传染病传播风险。并且羊膜厚度韧性等受供体影响较大，质量较难把控。

近年脂肪间充质干细胞被证明具有减少细胞凋亡、减轻炎症反应、抑制纤维化、提高组织修复潜力等重要的生物学功能，然而其治疗眼表损伤的研究局限于结膜下注射等，此种方式不仅损伤结膜组织，同时治疗效果欠佳。

本发明的目的在于提供一种角膜损伤修复的生物膜材料，它来源于脂肪间充质干细胞，不但生物相容性好，能降低移植后免疫反应；来源广泛，适合于大量生产，而且能够促进细胞生长，促进角膜缺损修复；降低炎症反应；降低后期角膜瘢痕形成，治疗修复甚佳。

发明内容

针对上述情况，为弥补现有技术所存在的不足，本发明提供一种生物相容性好，能够有效促进角膜缺损修复的角膜修复材料。

本发明解决问题的技术方案如下：

本发明的一个目的是提供一种角膜损伤修复的生物材料，所述角膜损伤修复的生物材料为脂肪间充质干细胞来源的脱细胞基质。

本发明的另一个目的是提供脂肪间充质干细胞来源的脱细胞基质在制备角膜结构和功能修复产品中的用途。

本发明的第三个目的是提供一种所述脂肪间充质干细胞来源的脱细胞基质的制备方法，所述制备方法包括获取脂肪间充质干细胞，传代培养和脱细胞基质的制备。

进一步地，所述获取脂肪间充质干细胞包括以下具体步骤：取获得的脂肪组织，洗涤后剪碎，浸泡在消化液中进行消化；消化完成后，离心、留沉淀，即得脂肪间充质干细胞。

进一步地，获取脂肪间充质干细胞过程中所述脂肪组织优选为抽脂或者重睑手术中获得的脂肪组织。

进一步地，获取脂肪间充质干细胞过程中所述洗涤介质为PBS缓冲液+100U/mL青霉素/链霉素。

进一步地，获取脂肪间充质干细胞过程中所述消化液为0.1～0.2％的胶原酶A。

进一步地，获取脂肪间充质干细胞过程中所述消化的温度为37℃，消化时间为8～10h；

进一步地，获取脂肪间充质干细胞过程中所述离心条件为：转速1000～1200rpm，时间8～12min。

进一步地，所述传代培养包括以下具体步骤：用培养液重悬获取的脂肪间充质干细胞，置于培养箱中，待细胞长至80％～90％密度时进行传代，停止传代后，更换培养液，进行3～4周的培养。

进一步地，传代培养过程中所述培养液配方为：DMEM+10％牛血清+100U/mL青霉素/链霉素。