[发明专利]一种结直肠癌或癌前病变的诊断或辅助诊断试剂、核酸组合、试剂盒及应用

说明书

本发明公开了一种结直肠癌或癌前病变的诊断或辅助诊断试剂、核酸组合、试剂盒及应用，涉及肿瘤检测技术领域。以人DOK6基因CpG岛的甲基化作为标志物，通过检测样本中DOK6基因的CpG岛的甲基化水平的增加可以对结直肠癌或癌前病变进行诊断或辅助诊断，具有较高的灵敏度和特异性。采用本发明提供的检测试剂和试剂盒能有效地提高结直肠癌的检出率，从而满足结直肠癌/癌前病变早筛早诊的临床需求。本发明提供的基因检测产品也可以为体检人群提供更好的肠道健康评估服务，实现对肠道病变的早发现、早诊断、早治疗，有利于节约家庭的医疗负担成本。

技术领域

本发明涉及肿瘤检测技术领域，具体而言，涉及一种结直肠癌或癌前病变的诊断或辅助诊断试剂、核酸组合、试剂盒及应用。

背景技术

结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一，主要包括结肠癌与直肠癌两大类。结直肠癌的预后与疾病诊断时的严重程度相关，美国结直肠癌患者5年生存率为67％。2004年至2013年，美国结直肠癌的发病率每年下降3％，整体死亡率平均每年下降2.7％，早期筛查在其中的贡献率超过50％。由于结直肠癌在早期缺少症状，目前结直肠癌的早期诊断率仅为10％左右，超过80％患者确诊时已到中晚期。

因此，提高腺瘤的检出率对于降低结直肠癌的发病率和死亡率极为重要。而结直肠癌传统的筛查方法包括粪便潜血试验、粪便免疫试验、结肠钡剂灌肠检查、乙状结肠镜检查以及结肠镜检查。其中，粪便潜血试验和粪便免疫试验具有一定的特异性和灵敏性，但前提是患者已存在明显的肿瘤大小，因此不适用于结直肠癌的早期检测。内窥镜检查提高了高危人群中结直肠癌的检出率，但患者接受度低、且操作不够灵活。

近期分子生物学方面的进展为开发简便、有效的早期诊断方法提供了新的方向，结直肠癌组织中存在多基因、多位点的甲基化，并且在结直肠癌发生的早期即出现DNA甲基化的改变，因此，甲基化改变可以作为食管癌早期诊断的标志物，从DNA甲基化角度探索结直肠癌诊断策略已成为一种新的思路。

结直肠肿瘤一般发生在结直肠上皮组织中，在其生长过程中，不断地有肿瘤细胞脱落至肠腔内并随着粪便排出。肿瘤细胞由于增生异常更容易从肠道脱落，因此肠道肿瘤患者的粪便中包含有大量的病变细胞和病变成分，检测粪便中的肿瘤细胞成分就可以提供一种无创的辅助诊断结直肠肿瘤方法。另外，肿瘤细胞也会释放DNA到血液中(cfDNA,circulating free DNA)，也可通过检测血液中的肿瘤DNA对结直肠癌进行检测，但cfDNA具有含量少、半衰期短的特点，使其在提取过程中容易丢失，因此检测难度巨大。

现有技术中公开的一些检测标记物对结直肠癌具有良好的检测效果，但对结直肠癌前病变的检测灵敏性和特异性较差，另外，目前尚缺少在粪便和血液中均具有优异检测效果的标记物。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种结直肠癌或癌前病变的诊断或辅助诊断试剂、核酸组合、试剂盒及应用以解决上述技术问题。

本发明是这样实现的：

本发明提供了一种结直肠癌或癌前病变的诊断或辅助诊断试剂在制备结直肠癌或癌前病变的诊断或辅助诊断产品中的应用，诊断或辅助诊断试剂为用于检测DOK6基因上的靶区域的甲基化的试剂，靶区域选自DOK6基因的如下至少一种区域中的全长区域或部分区域：区域I、区域II和区域III；

其中，区域I选自Chr18:69400274-69401932正链或Chr18:69401932-69400274负链，区域II选自Chr18:69402698-69402935正链或Chr18:69402935-69402698负链，区域III选自Chr18：69469672-69470012正链或Chr18：69470012-69469672负链。