[发明专利]一种分子印迹糖基介孔二氧化硅微球、制备方法与应用

权利要求书

1.一种分子印迹糖基介孔二氧化硅微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)合成硼酸化功能单体：由4-巯基苯硼酸和3-(甲基丙烯酰氧基)丙基三甲氧基硅烷通过硫醇-烯点击反应合成硼酸化功能单体；

(2)将250mg十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)溶解在120ml H₂O中，加入50mg模板分子和1.0ml、2mol/L NaOH溶液，加热至80℃；然后将1.25ml、6mmol的正硅酸乙酯(TEOS)和硼酸化功能单体缓慢加入上述溶液中，水解4小时，并冷却至室温，离心，用水和甲醇洗涤，真空干燥，得到糖基印迹介孔二氧化硅微球；

所述模板分子为糖肽类抗生素的糖基部分；所述硼酸化功能单体和正硅酸乙酯的摩尔比为0.3∶9.7；

(3)用体积比为9∶1的乙醇-盐酸溶液进行索氏提取去除糖基印迹介孔二氧化硅微球中的CTAB和模板分子，用甲醇洗涤糖基印迹介孔二氧化硅微球，并真空干燥。

2.根据权利要求1所述的一种分子印迹糖基介孔二氧化硅微球的制备方法，其特征在于，步骤(1)合成硼酸化功能单体，具体为：将248.35μlγ-(甲基丙烯酰氧基)丙基三甲氧基硅烷和147.9mg的4-巯基苯硼酸溶解在5ml的无水乙醇中，用三乙胺调节溶液的pH至8.0，在60℃水浴中搅拌6小时，4℃保存。

3.权利要求1或2所述方法制得的一种分子印迹糖基介孔二氧化硅微球。

4.权利要求3所述一种分子印迹糖基介孔二氧化硅微球在血清样品中糖肽抗生素检测中的应用。

5.根据权利要求4所述的一种分子印迹糖基介孔二氧化硅微球在血清样品中糖肽抗生素检测中的应用，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)将100μl血样加入2.0ml离心管中，再加入1.5ml、0.1mol/L、pH 8.5的磷酸盐缓冲溶液，振荡5分钟；

(2)将10mg分子印迹糖基介孔二氧化硅微球分散到上述混合物中，600rpm振荡20分钟，接着10000rpm离心分离微球，并用200μl水洗涤两次；

(3)用1.5ml、pH 4.0的体积比为1∶1的磷酸盐缓冲溶液/甲醇混合溶液洗脱目标糖肽类抗生素，10000rpm离心10分钟，并用离心浓缩机在真空条件下将洗脱液蒸发至干，再复溶于200μl的0.2wt％甲酸溶液中，0.22μm滤膜过滤，用于UPLC-MS/MS分析。