[发明专利]一种稳定产生牛病毒性腹泻病毒抗原的细胞系及抗体胶体金检测试纸条的制备方法

权利要求书

1.一种持续稳定产生牛病毒性腹泻病毒抗原的细胞系，其保藏编号为CGMCCNo.22351。

2.一种牛病毒性腹泻病毒抗体胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

A)将权利要求1所述的细胞系进行扩大培养，收获细胞培养上清液和细胞，反复冻融2～3次后，通过差速离心和PEG沉淀，获得纯化的牛病毒性腹泻病毒抗原；

B)将牛病毒性腹泻病毒抗原与胶体金进行第一偶联，得到牛病毒性腹泻病毒抗原-胶体金偶联标记物；

将IgG与胶体金进行第二偶联，得到IgG-胶体金偶联标记物；

C)将牛病毒性腹泻病毒抗原-胶体金偶联标记物、IgG-胶体金偶联标记物分别喷在玻璃纤维素膜上，干燥，获得金标结合垫；

将牛病毒性腹泻病毒抗原、IgG分别划膜于硝酸纤维素膜上的检测线和质控线上；

D)将样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫依次粘贴在底板上，切条、组装、密封，获得牛病毒性腹泻病毒抗体胶体金检测试纸条。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述胶体金的粒径大小为40～60nm。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，第一偶联时，牛病毒性腹泻病毒抗原与胶体金溶液的用量比例为30～40μg:1mL。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，第二偶联时，IgG与胶体金溶液的用量比例为3.5～4.5μg:1mL。

6.根据权利要求2至5中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤B)中IgG为小鼠IgG，步骤C)中IgG为羊抗鼠IgG。