[发明专利]具有防治老年痴呆功效的猴头菌菌丝体多糖及制备方法

权利要求书

1.一种具有神经保护及防治老年痴呆的猴头菌菌丝体多糖，其特征在于：

分子量为36.1kDa，由岩藻糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、甘露糖及葡萄糖醛酸六种单糖组成，其摩尔比为0.03:0.09:0.67:0.02:0.14:0.05，结构可表示为→3)-α-D-Glcp-(1→3)-α-D-Glcp-(1→6)-α-D-Galp-(1→6)-α-D-Glcp-(1→6)-α-D-Glcp-(1→3)-α-D-Glcp-(1→作为主链和β-D-Manp-(1→3)-α-D-Glcp-(1→2)-α-D-Manp-(1→6)-α-D-Glcp-(1→6)-为分支。

2.如权利要求1所述一种具有神经保护及防治老年痴呆的猴头菌菌丝体多糖的制备方法，包括以下步骤：

1)深层液体发酵获得的猴头菌菌丝体经冷冻冻干后超微粉碎成粉末，过150目筛；加入质量12倍质量的去离子水，搅拌均匀后浸泡30分钟，于80℃恒温水浴中提取2.5小时；

2)冷却至室温后离心取上清，旋转蒸发浓缩至1/6体积，Sevag法去蛋白；取上清液浓缩，使用80％v/v乙醇进行沉淀，4℃过夜，收集沉淀，进行冻干，即获得猴头菌菌丝体粗多糖，称为HE；

3)将猴头菌菌丝体粗多糖用去离子水溶解，通过快流速二乙胺基乙基琼脂糖凝胶，以氯化钠溶液洗脱，浓度为0.1mol/L，流速为1.0mL/min，分别收集溶液，苯酚-硫酸法测定多糖含量，收集主峰，旋转蒸发浓缩至1/8体积,4℃下80％v/v醇沉过夜，收集沉淀，进行冻干；

4)将通过DEAE凝胶柱获得的猴头菌菌丝体多糖冻干粉末溶于去离子水，通过HiLoad16/600Superdex 200制备级色谱柱进行进一步纯化，去离子水洗脱，分管收集，采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，收集主峰，旋转蒸发浓缩至1/8体积,4℃下80％v/v醇沉过夜，收集沉淀，进行冻干即获得猴头菌菌丝体纯化多糖PHEB。