[发明专利]一种荧光传感系统及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种荧光传感系统，其由包覆香豆素6的巯基修饰纳米荧光脂质体CM6@Lip‑SH分散液与氨基功能化金包四氧化三铁纳米粒子NH₂‑Au@Fe₃O₄分散液组成。本发明提供的荧光传感系统可用于快速检测展青霉素，选择性好，回收率高，背景干扰小，重现性好；无需依赖昂贵的大型仪器，前处理简单，且在保证结果准确性的同时，实现了快速检测，极大的节省了成本，提高了检测效率。

技术领域

本发明涉及食品检测分析技术领域，具体地说涉及一种荧光传感系统及其制备方法和应用。

背景技术

展青霉素(Patulin，PAT)是一种由曲霉属菌、青霉属菌和丝衣霉属菌产生的高度危险的霉菌毒素，经常在水果中被发现，特别是在苹果、葡萄及其衍生物中。急性和慢性摄入展青霉素可导致呼吸和泌尿系统损伤，使人神经麻痹、肺水肿和肾功能衰竭。由于展青霉素毒性高且广泛存在，美国、欧盟和中国规定了苹果汁中的最高限量为50ng mL^-1。

近年来，展青霉素的检测方法主要包括气相/液相色谱法、气相/液相色谱法串联质谱法，酶联免疫分析法和薄层色谱法等，这些检测手段灵敏度高，样品检测量大，也非常适合于复杂样品的分离分析；但其中大多数需要昂贵的仪器、复杂的操作和漫长的时间，这限制了它们在现场测试的广泛应用，特别是在资源稀缺地区。

因此有必要研发一种高灵敏、高特异性展青霉素快速检测方法。

发明内容

本发明首先提供了一种荧光传感系统，其由包覆香豆素6的巯基修饰纳米荧光脂质体(CM6@Lip-SH)分散液与氨基功能化金包四氧化三铁纳米粒子(NH₂-Au@Fe₃O₄)分散液组成；

其中CM6@Lip-SH纳米材料分散液的脂质浓度为10mg mL^-1，是将CM6@Lip-SH纳米材料分散在0.01mol L^-1的PBS溶液中得到；其中NH₂-Au@Fe₃O₄分散液的浓度为5mg mL^-1，是将NH₂-Au@Fe₃O₄分散在水中得到；

其中包覆香豆素6的巯基修饰纳米荧光脂质体(CM6@Lip-SH)分散液作为展青霉素的识别元件与荧光探针；氨基功能化金包四氧化三铁纳米粒子(NH₂-Au@Fe₃O₄)分散液作为脂质体表面巯基基团的识别元件与磁性分离材料；

其中包覆香豆素6的巯基修饰纳米荧光脂质体(CM6@Lip-SH)是通过如下方法制备得到的：

(1)将20mg胆固醇，60-140mg大豆磷脂，1-10mg DSPE-PEG-SH(二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-巯基)，0.01-0.2mg香豆素6溶于15mL二氯甲烷中，超声至分散均匀；将该分散液转移至圆底烧瓶且置于旋转蒸发仪中将溶剂完全挥发，形成一层薄膜附在瓶壁，往圆底烧瓶中加入2mL的0.01mol L^-1PBS缓冲溶液(pH＝7.4)和50μLTCEP(10mmol L^-1)溶液，继续水合1小时，最后得到绿色的凝胶状液体；

(2)将(1)所得的凝胶状液体在细胞破碎仪下超声3min，超声完成后再通过0.22μm的滤膜三次，随后在0.01mol L^-1PBS缓冲溶液(pH＝7.4)中透析3-6小时以去除杂质影响，最后分散在上述0.01mol L^-1的PBS溶液中制备获得CM6@Lip-SH纳米材料分散液，脂质浓度为10mg mL^-1。