[发明专利]一种用于检测犬乙型脑炎病毒抗体的胶体金试纸条及其制备方法

说明书

本发明涉及一种用于检测犬乙型脑炎病毒抗体的胶体金试纸条制备方法及其制备方法，属于病原体检测领域。为了克服现有技术中缺少检测犬流行性乙型脑炎的快速简便的检测方法的不足，本发明提供一种用于检测犬乙型脑炎病毒抗体的胶体金试纸条的其制备方法及其制备方法，该方法是以重组工程菌株的表达纯化的重组犬乙型脑炎病毒EDⅢ抗原，制备得到检测犬乙型脑炎病毒抗体的胶体金试纸条，本发明所建立犬乙型脑炎抗体GICA检测方法，其重复性好、特异性和敏感性高，其可以满足基层对JEV抗体快速、简便检测方法的需要。

技术领域

本发明涉及一种用于检测犬乙型脑炎病毒抗体的胶体金试纸条制备方法及其制备方法， 属于病原体检测领域。

背景技术

流行性乙型脑炎(Japanese Encephalitis,JE)是由流行性乙型脑炎(Japaneseencephalitis virus，JEV)引起的以中枢神经系统损害为主的人兽共患的传染病。该病以蚊 虫为媒介传播，具有明显的季节性和一定的地理分布区，主要发生于亚洲，随着人类活动及 全球气候的变化,其流行分布范围有不断扩大的趋势。该病在人群中传播常发生于10岁以下 儿童，临床上以高热、抽搐、意识障碍、呼吸衰竭、病理反射和脑膜刺激征为主要临床特征, 危重病例病死率高或有后遗症。全球约有30亿人居住在流行区，这些地区每年新生儿约7000 万。据估计,每年有35000～50000病例,其中10000例死亡，约15000例有留有不同程度的神 经系统后遗症。其中,我国是猪流行性乙型脑炎高发区之一,而且是流行性乙型脑炎发病人数 最多的国家，占世界总发病数的80％以上。目前，流行性乙型脑炎已成为导致我国乃至亚洲 儿童神经系统病毒感染和残疾的首要原因，

近年来犬作为伴侣动物日益成为人们生活的一部分，其与人类关系愈来愈密切。目前国 内外一些研究结果和我们前期对犬JEV血清流行病学调查显示部分宠物犬体内存在JEV抗体， 且阳性率较高。日本学者Shimoda等对日本流浪犬和豢养犬JEV血清学调查结果综合分析提 示，人JEV的流行与犬JEV感染情况有紧密的联系。进一步分析认为虽然猪是JEV的最重要 的中间扩增宿主，但是猪群抗体阳性率高，并与人居住地存在一定的距离，部分猪群还进行 JEV免疫，因此猪JEV流行情况不完全能准确地反映和评估人类感染JEV的风险，相对而言， 豢养犬与人的生活关系紧密而且不打疫苗，豢养犬JEV流行情况能准确地反映和评估人类感 染JEV的风险，因此犬适合作为人JEV疫情监测和风险评估的哨兵动物。因而，建立犬JEV 的快速检测技术，对于评估犬JEV公共卫生安全风险具有极其重要的意义。

目前,在实际工作中检测JEV的常用方法有ELISA、RT-PCR和病毒分离鉴定等，其操作 过程复杂，受到检测时间和试剂成本的限制,而且上述方法都需要一定的条件和设备，难以在 基层推广。因此，针对我国JEV的流行情况，研制一种快速、简便、敏感的检测方法是非常 必要的。作为新一代免疫检测技术，胶体金免疫层析法(Gold immunochromatographyassay， GICA)利用胶体金(Colloidal gold)作为示踪标识物，具有肉眼判定、快速准确和应用简便 等优点，受到广泛重视。但是GICA应用于犬乙型脑炎抗体检测并未见极道。基于此，特提 出本发明。

发明内容

为了克服现有技术中缺少检测犬流行性乙型脑炎的快速简便的方法，本发明提供一种用 于检测犬乙型脑炎病毒抗体的胶体金试纸条的其制备方法及其制备方法，该方法是以重组工 程菌株的表达纯化的重组犬乙型脑炎病毒EDⅢ抗原，制备得到检测犬乙型脑炎病毒抗体的 胶体金试纸条，本发明所建立犬乙型脑炎抗体GICA检测方法，其重复性好、特异性和敏感 性高，其可以满足基层对JEV抗体快速、简便检测方法的需要。

本发明通过下述技术方案实现上述技术效果：