[发明专利]银杏叶滴丸中黄酮醇苷类成分含量测定方法

说明书

本发明涉及中药含量测定分析方法，具体涉及银杏叶滴丸中黄酮醇苷类成分含量测定方法建立及11批银杏叶滴丸含量测定结果。本发明公开了一种直接测定银杏叶滴丸中6种黄酮醇苷类成分的方法，所述建立方法包括供试品溶液的制备、色谱条件的建立及测定，可以同时测定6个黄酮醇苷类成分的含量。本发明的改进点在于：1、直接测定原型黄酮醇苷成分的含量，在一定程度上可以减少加入廉价黄酮醇苷掺假的违法行为，可以更好的对银杏叶、银杏叶提取物及其制剂进行质量控制。2、本方法具有精密度、稳定性、重复性及准确度好的优点，方法简单稳定。

技术领域

本发明涉及中药含量测定分析方法，具体涉及银杏叶滴丸中黄酮醇苷类成分含量测定方法建立及11批银杏叶滴丸含量测定结果。

背景技术

银杏叶滴丸收载于《中国药典》2020年版(第一部)，由银杏叶提取物与聚乙二醇4000加热溶化，混匀，滴入甲基硅油冷却剂中，除去表面油迹，或包薄膜衣制备而成，主要用于瘀血阻络引起的胸痹心痛、中风、半身不遂，舌强语謇；冠心病稳定性心绞痛、脑梗死见上述证候者。

黄酮醇苷类成分复杂，是银杏叶滴丸中主要的活性成分，现行标准中，采用水解测苷元法间接测定总黄酮醇苷的含量，但此方法无法鉴别出掺假的违法行为，因此，需要建立一种直接测定黄酮醇苷的方法，从原型黄酮醇苷的角度直接进行质量控制。

发明内容

为了实现上述目的，本发明提供银杏叶滴丸黄酮醇苷类成分含量测定的建立方法，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取银杏叶滴丸适量，研细，取粉末0.2g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇40mL，超声处理40min(40KHz,500W)，取出，冷却至室温，摇匀，13000rpm，离心10min，取上清液，即得。

(2)对照品溶液的制备：精密称取芦丁(Rutin)、槲皮素-3-O-葡萄糖基(1-2)鼠李糖苷(Quercetin-3-O-glucosyl-(1-2)-rhamnoside

，QGR)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(Kaempferol-3-O-rutinoside，K-3-R)、异鼠李素-3-O-芸香糖苷(Isorhamnetin-3-O-rutinoside，I-3-R)、槲皮素-3-O-2-(6-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷(Quercetin-3-O-2-(6-p-coumaroyl)-glucosyl-rhamnoside，QRCG)、山柰酚-3-O-2-(6-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷(kaempferol-3-O-2-(6-p-coumaroyl)-glucosyl-rhamnoside，KRCG)6个标准品各5.26mg、4.46mg、5.45mg、5.22mg、4.82mg及4.66mg分别于2mL的容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，精密移取上述6个单标溶液各0.8mL作为混合标准品母液。

(3)色谱条件：色谱柱：Agilent InfinityLab Poroshell 120EC-C₁₈(2.1×150mm,2.7μm)，流动相：以0.05％甲酸溶液为流动相A，以乙腈-甲醇(7：3)为流动相B，梯度洗脱：0-6min，16％B；6-20min，16-19％B；20-21min，19-20％B；21-34min，20-25％B；34-35min，25-27％B；35-43min，27-35％B；43-47min，35-38％B；47-50min，38-95％B；50-53min，95％B；流速：0.3mL/min；进样量：2μL；柱温：40℃；检测波长：360nm。

(4)含量测定：将11批银杏叶滴丸分别按照上述步骤(1)制成供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，按照上述步骤(3)的色谱条件进行检测，分别记录保留时间和峰面积，采用标准曲线法计算待测成分百分含量。

本发明公开了一种直接测定银杏叶滴丸中6种黄酮醇苷类成分的方法，所述建立方法包括供试品溶液的制备、色谱条件的建立及测定，可以同时测定6个黄酮醇苷类成分的含量。